“Bicentenário da Independência: 200 anos de ciência, tecnologia e inovação no Brasil e 96 anos de contribuição da UFV”.
8 a 10 de novembro de 2022
Trabalho 16614
| ISSN | 2237-9045 |
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| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Agronomia |
| Setor | Departamento de Agronomia |
| Bolsa | Outros |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | Outros |
| Primeiro autor | Lucas Matheus da Rocha Gonçalves |
| Orientador | SERGIO YOSHIMITSU MOTOIKE |
| Outros membros | DIEGO ISMAEL ROCHA, Fernanda Maria Vitor França Costa, João Carlos Teixeira Fernandes, Lorena Melo Vieira |
| Título | Determinação da competência de massas pró-embriogênicas de Pinus taeda a partir da dupla coloração com carmim acético e azul de Evans |
| Resumo | A embriogênese somática é um modelo completo da totipotência celular. A utilização de explantes meristemáticos para a indução de embriões somáticos em Pinus taeda é uma alternativa à materiais maduros, comumente utilizados, mas sob forte controle genético e recalcitrantes. A obtenção de massas celulares, comprovadamente embriogênicas, possibilita dar continuidade à protocolos alternativos e eficientes. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi detectar a competência embriogênica de calos obtidos a partir de do cultivo de ápices caulinares sob diferentes meios de indução, utilizando o teste histoquímico de Azul de Evans e Carmim acético. Explantes meristemáticos obtidos de dois genótipos UFV10 e UFV11, foram coletados no Jardim Clonal no Viveiro do Departamento de Engenharia Florestal da Universidade Federal de Viçosa. Os genótipos foram divididos em dois tamanhos: UFV10 (0,4 a 1cm e 1,4 a 2cm) e UFV 11(0,8 a 1,2cm e 2,0 a 2,7cm). Os ápices caulinares foram desinfestados e inoculados em placas de Petri contendo 30mL de quatro composições diferentes de meios de cultura para a indução de embruiogênese somática. Foram testados o meio de indução 2785 e 1133, previamente estabelecidos para P. taeda, com adaptações,, EDM6 e o meio de cultura Y3, todos suplementados com auxinas. Após 10 e 40 dias da inoculação, na capela de fluxo laminar, foi seccionada uma parte dos calos, oriundos de cada tratamento, e colocados sobre lâminas de vidro. Em seguida foram adicionadas três gotas do corante Azul de Evans 1% por 3 minutos, retirou-se o excesso do corante e foram acrescentadas três gotas de Carmim acético 2% pelo mesmo tempo. Posteriormente, lavou-se o explante com água deionizada para a retirada do excesso dos corantes e posicionou-se uma lamínula sobre o calo efetuando-se leve pressão. A visualização das lâminas e captura das imagens foi realizada em microscópio óptico. Após 10 dias de inoculação foi observado intenso calejamento em todos os tratamentos. Calos com potencial embriogênico foram verificados nos meios de indução EDM6 e 2785, ambos a partir do genótipo UFV11 e meristemas com 2,0 a 2,7 cm de comprimento. Esse mesmo material foi avaliado após 30 dias de inoculação, onde constatou-se a evolução do calo e um certo nível de oxidação. Após 40 dias da indução, apenas no material inoculado no meio 2785 foram observadas massas celulares coradas de vermelho indicando reação positiva ao teste e confirmando a competência embriogênica das células em diversas regiões do calo. Constatou-se ainda células do calo alongadas e coradas de azul apontando reação negativa ao teste nas regiões oxidadas com coloração marrom. A constatação de competência embriogênica em calos cultivados no meio 2785 abrem novas perspectivas para obtenção de embriões somáticos a partir de explantes meristemáticos, possibilitando a clonagem de material adulto de interesse. |
| Palavras-chave | Pinus taeda, Embriogênese somática, Teste histoquímico |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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