“Bicentenário da Independência: 200 anos de ciência, tecnologia e inovação no Brasil e 96 anos de contribuição da UFV”.
8 a 10 de novembro de 2022
Trabalho 16490
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Medicina veterinária |
| Setor | Departamento de Veterinária |
| Bolsa | FAPEMIG |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Luísa Maria de Souza Menezes |
| Orientador | MARIA APARECIDA SCATAMBURLO MOREIRA |
| Outros membros | Jéssica Lobo Albuquerque Caldeira, Juliana Miwa Fujikura, Richard Costa Polveiro |
| Título | Atividade de NAGase como um possível teste para mastite caprina |
| Resumo | Para o diagnóstico e tratamento da mastite é necessária a associação de avaliações que detectem a inflamação e identifique rapidamente o agente etiológico. Os testes como California Mastitis Test (CMT) e Contagem de Células Somáticas (CCS) são pouco conclusivos nos rebanhos caprinos sendo necessário a busca por novos métodos de diagnóstico. A NAGase é uma enzima liberada no processo hidrolítico a fim de degradar tecido danificado em uma ação pró-inflamatória, desse modo pode ser usada como parâmetro adequado para o diagnóstico de mastite em cabras leiteiras pois o aumento de sua atividade está relacionado com defesa imunológica durante infecção no úbere. No presente estudo foi analisado a ação da NAGase lisossomal no leite de animais mastíticos naturalmente infectados com o objetivo de avalia-la como um indicador de mastite caprina, padronizando um teste fluorométrico da mesma e comparando os resultados obtidos com testes já realizados de CCS e CBT. Foram trabalhadas 50 amostras de leite de animais mastíticos e a atividade da NAGase foi medida utilizando o método fluorimétrico em placas. As amostras foram incubadas com 4-MUAG, que é transformada por NAGase em 4-MU fluorescente e depois medida por meio de um fluorímetro. Dez microlitros de amostra teste, leite controle e água destilada foram pipetados nos poços em duplicata. Em cada poço, 40 µl de substrato (2,25 mM 4-MUAG, M-2133 Sigma-Aldrich®) em tampão citrato foi adicionado. A placa foi colocada em uma caixa escura em um agitador por um minuto. Após a mistura, uma incubação de 14 minutos a 20 ° C foi realizada para permitir que a NAGase libere 4-MU em um ambiente ácido, e 150 µl de tampão glicina foi adicionado a cada poço e agitado por um minuto. A fluorescência do 4-MU resultante foi medida em um fluorímetro usando um filtro excitação de 355 nm e um de emissão de 460 nm. O resultado estatístico mostrou que apenas 10 animais foram positivos para mastite considerando o valor mínimo de CBT, enquanto 37 foram contados usando o limite de CCS. A média da atividade da NAGase foi de 1,45 vezes nos indivíduos selecionados pelo limite de CBT (26146,16_17707,47) do que aqueles (18051,53_15131,60) usando CCS. Além disso, o valor mínimo da atividade da NAGase utilizando o limite CBT foi 2,70 vezes o valor mínimo utilizando o limite CCS. A correlação de Pearson revelou uma associação linear moderada de NAGase com CBT (0,51) e CCS (0,63) e não foi detectada correlação significativa entre CBT e CCS. Embora os estudos continuam, os dados obtidos até o momento, mostram que o teste da NAGase se apresentou como uma promissora ferramenta para o diagnóstico de mastite caprina, podendo complementar os testes tradicionais ou até mesmo com potencial para ser usada exclusivamente nessa função. |
| Palavras-chave | teste fluorométrico, ruminante, leite |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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