“Bicentenário da Independência: 200 anos de ciência, tecnologia e inovação no Brasil e 96 anos de contribuição da UFV”.
8 a 10 de novembro de 2022
Trabalho 16112
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Bioquímica |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | FAPEMIG |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | FAPEMIG |
| Primeiro autor | Vinicius dos Santos Romagnoli |
| Orientador | TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES |
| Outros membros | Jacqueline de Araújo Fiuza, Luiza de Oliveira Possa, Maria Roméria da Silva, Renato Lima Senra |
| Título | Avaliação de Nova Formulação Vacinal Contendo Antígeno Quimérico Recombinante Contra Anaplasmose |
| Resumo | Anaplasma platys é uma bactéria causadora da anaplasmose, doença transmitida por carrapatos do gênero Rickettsia, com alta taxa de infecção e morbimortalidade de cães infectados, também provocando a doença em bovinos, felinos e humanos. O objetivo do projeto foi desenvolver um uma nova formulação vacinal contendo proteína recombinante para reduzir a infecção por A. platys. O projeto foi previamente aprovado pelo CEUA/UFV (processo no 33/2020). Camundongos BALB/C machos adultos (6 a 8 semanas de idade) foram imunizados conforme um protocolo tipo dose-reforço, composta de 3 doses em intervalos de 14 dias, por via subcutânea. Os animais foram imunizados com salina (grupo controle 1), adjuvante apenas (controle 2) ou formulações contendo 10 ug do antígeno e os adjuvantes,. Após 15 dias da última imunização, os camundongos foram desafiados através da inoculação intraperitoneal de 1 x 103 UFC de A. platys. Os grupos do experimento foram: Grupo 1: Controle não imunizado e infectado com A. platys; Grupo 2: Controle imunizado com Saponina + Hidróxido de Alumínio e infectado com A. platys; Grupo 3: Teste imunizado com proteína quimera + Saponina + Hidróxido de Alumínio e infectado com A. platys; Grupo 4: Controle imunizado Emulsigen e infectado com A. platys; Grupo 5: Teste imunizado com proteína quimera + Emulsigen e infectado com A. platys. Para avaliação de efetividade do candidato vacinal, foi utilizada a imunofenotipagem de linfócitos T CD4+ e CD8+ em células isoladas do baço de cada animal, sendo as células obtidas incubadas em anticorpos anti-CD4, anti-CD8b e anti-CD3, sendo analisadas por citometria de fluxo. Também foi realizada a dosagem de citocinas por ELISA, mensurando concentração de IL-4, IL-10 e IFN-γ. O DNA de cada animal foi extraído e utilizado para análise de PCR em tempo real, com o objetivo de quantificação de patógeno. Para os animais desafiados com A. platys, pôde-se observar que houve controle significativo de patógeno para o grupo imunizado com H/S + proteína em relação ao grupo controle. O percentual médio de proteção representa a porcentagem de redução de carga parasitária conferido pela imunização com a proteína. Sendo assim, esses resultados mostraram que a proteína combinada com hidróxido de alumínio e saponina conferiu a maior proteção, sendo capaz de reduzir a carga parasitária de A. platys em 99,9%. Em relação ao desafio dos animais com A. platys para indução de células CD4+, o adjuvante H/S foi o mais eficiente. Ao analisar os tratamentos de adjuvantes + proteína, observou-se que a maior resposta foi para H/S + proteína. Para as células CD8+ os resultados foram similares. H/S e H/S + proteína induziram os maiores percentuais dessas células. Dessa forma, quando comparado com outro adjuvante em associação com proteína, H/S apresentou o melhor resultado. Esses dados sugerem que a formulação produzida foi eficiente para controlar o patógeno e novos experimentos em modelo cão estão atualmente em planejamento. |
| Palavras-chave | Doenças do carrapato, proteína quimera, antígeno vacinal |
| Forma de apresentação..... | Vídeo |
| Link para apresentação | Vídeo |
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