“Bicentenário da Independência: 200 anos de ciência, tecnologia e inovação no Brasil e 96 anos de contribuição da UFV”.
8 a 10 de novembro de 2022
Trabalho 15988
| ISSN | 2237-9045 |
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| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Agronomia |
| Setor | Departamento de Fitopatologia |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Hernandes Peres Panichi |
| Orientador | JORGE LUIS BADEL PACHECO |
| Outros membros | Adryelle Anchieta Sousa |
| Título | Obtenção de extrato bruto de Pseudomonas mediterranea com atividade antimicrobiana contra Ralstonia solanacearum |
| Resumo | A murcha bacteriana causada por Ralstonia solanacearum (Rs) é considerada como uma das doenças mais prejudiciais aos cultivos do tomateiro. Na atualidade, não existem produtos químicos ou de natureza biológica registrados pelo Ministério de Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) do Brasil para o controle da doença. Nosso laboratório detém da estirpe de Pseudomonas mediterranea (Pm) CFBM-UFV-ADR2, a qual inibiu o crescimento in vitro de estirpes representativas de bactérias patogênicas ao tomateiro. Os objetivos do trabalho foram: (1) selecionar estirpes de Rs patogênicas ao tomateiro para realizar testes de inibição por compostos produzidos por Pm CFBM-UFV-ADR2, e (2) obter um extrato bruto do sobrenadante livre de células do cultivo de Pm CFBM-UFV-ADR2 com atividade inibitória do crescimento dos isolados de Rs selecionados. Para atingir o primeiro objetivo, mudas de tomate da cultivar Santa Cruz Kada foram crescidas em mistura de solo e substrato e quando tinham duas folhas expandidas as suas raízes foram pulverizadas com suspensões de Rs padronizadas na OD600 = 0,3. No total, 18 estirpes de Rs de diferentes origens geográficas foram testadas. As plantas inoculadas foram transplantadas para vasos de 1 L, mantidas em casa de vegetação e os sintomas de murcha foram avaliados usando escala durante um período de 30 dias após inoculação. Para atingir o segundo objetivo, um cultivo de Pm CFBM-UFV-ADR2 crescido em meio King B líquido a 28 ºC durante 48 h, foi centrifugado e o sobrenadante filtrado através de membranas de 0,22 µm. O sobrenadante livre de células foi acidificado com HCl 6N até chegar a pH 2,0, mantido a 4 ºC overnight e posteriormente centrifugado. O pellet foi suspenso em 20 mL de metanol e submetido a evaporação rotativa. O extrato bruto foi liofilizado e o pó suspenso em PBS (tampão fosfato salino) na concentração de 15 mg/mL. Testes de difusão simples em meio CPG (caseína, peptona, glicerol) sólido foram realizados utilizando sobrenadante livre de células ou extrato bruto do sobrenadante para determinar a inibição do crescimento das estirpes selecionadas de Rs. Todos os isolados de Rs testados causaram murcha bacteriana na cultivar Santa Cruz Kada, mas apresentaram agressividade diferencial. Com base nos dados de agressividade, as estirpes Rs 346, Rs 345 e Rs 332 foram selecionadas para realizar os testes de inibição por Pm CFBM-UFV-ADR2 in vitro. As estirpes Rs 345 e Rs 332 foram sensíveis ao sobrenadante livre de células enquanto as três estirpes demonstraram sensibilidade ao extrato bruto. Conclui-se que o extrato bruto do sobrenadante de Pm CFBM-UFV-ADR2, preparado por precipitação ácida e extração com metanol, contém compostos que inibem o crescimento de isolados de Rs de diversas origens geográficas e que apresentam diferente agressividade. Ensaios em casa de vegetação serão conduzidos para determinar a capacidade do extrato bruto em suprimir os sintomas de murcha causada por Rs no tomateiro. |
| Palavras-chave | antagonismo, inibição de crescimento, murcha bacteriana. |
| Forma de apresentação..... | Vídeo |
| Link para apresentação | Vídeo |
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