Resumo |
A criopreservação é um processo que, em função das mudanças osmóticas ocorridas no espermatozoide, leva a uma disfunção mitocondrial e aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), alterando assim sua homeostase. Em função disso, pesquisas voltadas para os procedimentos relacionados a criopreservação de sêmen são importantes, especialmente de garanhões, que são reconhecidamente sensíveis aos efeitos deletérios do glicerol, o principal crioprotetor intracelular utilizado para congelamento espermático. Com isso, objetivou-se com o presente estudo comparar o efeito do glicerol e da dimetilformamida, em concentrações finais de 5%, associados ou não, sobre o nível de peroxidação lipídica das membranas espermáticas. Para tanto, foram coletados cinco ejaculados de quatro garanhões da raça Mangalarga Marchador aprovados em exame andrológico. Para o congelamento dos ejaculados, foi utilizado o meio comercial Botu-Crio® sem crioprotetor, constituindo esse o meio base para os tratamentos: glicerol 5% (T1); dimetilformamida 5% (T2); glicerol 2% e dimetilformamida 3% (T3); e Botu-Crio® comercial (grupo controle – C). O experimento foi realizado em Viçosa-MG, em delineamento inteiramente casualizado, no esquema fatorial 4X4. As amostras foram descongeladas e avaliadas quanto à peroxidação de membrana plasmática, mediante uso da sonda C11- BODIPY581/591 associada à sonda iodeto de propídeo em citometria de fluxo, além da viabilidade in vitro mediante avaliação de motilidade e vigor espermático em microscopia óptica de luz. Apesar do uso da dimetilformamida ou a sua combinação com o glicerol melhorar as características in vitro do sêmen em relação aos demais tratamentos, a peroxidação da bicamada lipídica avaliada mediante a utilização da sonda C11-BODIPY581/591 não variou entre os tratamentos. Tal resultado sugere que o estresse oxidativo inerente à criopreservação, no presente estudo, não foi suficiente para ocasionar lipoperoxidação espermática, independente da integridade da membrana plasmática, mediante os diferentes tratamentos utilizados. |