Bioeconomia: Diversidade e Riqueza para o Desenvolvimento Sustentável
21 a 25 de outubro de 2019
Trabalho 12148
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Pós-graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Biologia Geral |
| Bolsa | CAPES |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Alessandra de Oliveira Faustino |
| Orientador | DENILCE MENESES LOPES |
| Outros membros | LEANDRO LICURSI DE OLIVEIRA, Palloma Porto Almeida |
| Título | Utilização de abelhas adultas em análises de Citometria de Fluxo |
| Resumo | A determinação do tamanho do genoma é de grande relevância para estudos de diversidade genética, taxonomia, relações filogenéticas e evolutivas. Em abelhas, os trabalhos feitos até o momento, utilzaram larvas para a quantificação. Porém, esse material é de dificil acesso, podendo destruir o ninho para sua obtenção. Sendo assim, o uso de adultos pode facilitar os estudos de quantificação do genoma em abelhas. O objetivo desse trabalho foi avaliar a eficiência da quantificação do DNA nuclear em diferentes tampões utilizando abelhas adultas. Núcleos foram isolados da cabeça de abelhas adultas de Scaptotrigona xantotricha e do padrão interno Drosophila melanogaster utilizando quatro tampões diferentes (Galbraith, LB01, TRIS e MgSO4). As amostras foram preparadas em microtubos contendo tampão de extração, cabeças de S. xantotricha e do padrão interno. O material foi triturado com pistilo, as suspenções obtidas foram filtradas e os núcleos corados com iodeto de propídio (PI). As amostras foram armazenadas a 4°C, no escuro e em seguida analisadas em citômetro de fluxo FACSVerse. Todo procedimento foi realizado em triplicatas. Para calcular a razão experimental, foram utilizados os valores adquiridos da análise de 90% dos núcleos das amostras (Intensidade Média de Fluorescência- MFI), através da fórmula, MFIScaptotrigona/MFIDrosophila. Os dados obtidos foram submetidos a análise de variância (ANOVA), com pós testes de comparação múltipla de Tukey ou Dunnett. O valor de referência do conteúdo de DNA medido em larvas de S. xantotricha é 0,43 pg. O tamanho do genoma obtido de adultos de S. xantotricha, apresentou pequenas variações não significativas em cada um dos tampões analisados. Os tampões Galbraith e TRIS apresentaram resultados similares. Valores similares, média de 0,42 pg, foi determinada quando os tampões LB01 e MgSO4 foram utilizados. Os coeficientes de variação (CVs) dos diferentes tampões foram satisfatórios, apresentando valores percentuais menores do que 5%. Três dos quatros tampões analisados, Galbraith, MgSO4 e TRIS, proporcionaram amostras com menores porcentagens de debri celular, sendo os valores, 81,53%, 86,83%, 81,27%, correspondentes a cada um dos tampões mencionados, respectivamente. As amostras que utilizaram o tampão LB01 foram as que obtiveram maior porcentagem de debri, com 96,67%. Os tampões utilizados apresentaram bom desempenho e baixo custo para suas elaborações. Galbraith, por exemplo, o tampão com melhores resultados dentre os tampões analisados, possui uma composição simples (MgCl2, citrato de sódio,MOPS e Triton X-100). As amostras cujos valores mais se aproximaram da razão teórica (2,39), foram as adquiridas com o tampão Galbraith (2,40) e as que mais se distanciaram foram as utilizando o tampão MgSO4 (2,34). Conclui-se que a análise de indivíduos adultos é confiável e contribui para preservação dos ninhos, facilitando estudos com outras espécies de abelhas. |
| Palavras-chave | citometria de fluxo, Scaptotrigona xantotricha, quantificação. |
| Forma de apresentação..... | Painel |