Bioeconomia: Diversidade e Riqueza para o Desenvolvimento Sustentável
21 a 25 de outubro de 2019
Trabalho 12108
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Agrárias |
| Setor | Departamento de Microbiologia |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Paulo Wilson Goulart |
| Orientador | DENISE MARA SOARES BAZZOLLI |
| Outros membros | ANTONIO GALVAO DO NASCIMENTO, Giarlã Cunha da Silva, Jéssica Nogueira Rosa, PATRICIA PEREIRA FONTES |
| Título | CARACTERIZAÇÃO FENOTÍPICA E ANÁLISE DA VIRULÊNCIA DE LINHAGENS DE Actinobacillus pleuropneumoniae ΔsRNA EM Galleria mellonella |
| Resumo | O patógeno bacteriano gram-negativo Actinobacillus peluropneumoniae, pertencente à família pasteurellaceae, é anaeróbia facultativa, capsulada e agente causal da pleuropneumonia suína, uma doença contagiosa que afeta suínos e gera significativas perdas econômicas. Por ser contagiosa, práticas como o confinamento contribui significativamente para a sua disseminação e o método de controle da doença se resume basicamente à antibioticoterapia, não existindo atualmente uma vacina eficaz, em face à diversidade de sorotipos circulantes, atualmente 18. Nesse sentido, uma estratégia promissora é a utilização de linhagens mutantes para pequenos RNAs (sRNAs) reguladores na construção de vacinas que superem a especificidade de sorotipos. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi analisar e caracterizar fenotipicamente linhagens mutantes para pequenos RNAs regulatórios do sorotipo 8, principal sorotipo circulante em Minas Gerais, afim de identificar linhagens com virulência atenuada e com características favoráveis ao desenvolvimento de uma vacina atenuada viva (Live Attenuated Vaccine) efetiva contra todos os sorotipos circulantes. Para tanto, cinco linhagens mutantes para sRNAs regulatórios (ΔsRNA), sendo três obtidas a partir do tipo selvagem MIDG 2331 (Δarrc16 - WT, Δarrc14 - WT e Δhfq - WT) e duas obtidas a partir da linhagem Δhfq (Δarrc16 - Δhfq e Δarrc14 - Δhfq) foram avaliadas quanto ao crescimento a partir de cultura de células, com densidade óptica (DO 600nm ) inicial de 0,1, em caldo BHI suplementado com NAD(10µg/ml-1), em microplacas de poliestireno de 96 poços incubadas à 37 °C em leitor de microplacas por 24 horas. Adicionalmente, estas linhagens foram avaliadas quanto à virulência no modelo de infecção alternativo Galleria mellonella, em que foram inoculadas uma suspensão de células (DO600nm 2,5), sendo as larvas de G. mellonella monitoradas por 96 horas. Foi também avaliado a capacidade de aderência em microplacas de poliestireno de 96 poços, partindo de cultura de células em caldo BHI/ NAD (10 µg/ml-1) à DO inicial de 0,1 para todas as linhagens estudadas. Todas as linhagens apresentaram taxas de crescimentos estatisticamente iguais, mas as linhagens mutantes apresentaram atenuação da virulência em G. mellonella, o que dá possibilidades de uso em vacina atenuada viva. Estas linhagens mutantes apresentaram também diminuição da capacidade de aderência comparadas ao tipo selvagem MIDG 2331, sugerindo que a ausência dos sRNAs afetou diretamente a aderência das células, podendo alterar o tempo de permanência e a capacidade de colonização do organismo hospedeiro. Portanto, apesar dos resultados favoráveis com relação à atenuação da virulência das linhagens mutantes analisadas, novos estudos são necessários para caracterizar estas linhagens dando possibilidades de se identificar o papel desses sRNAs na capacidade de colonização do hospedeiro bem como na sua imunogenicidade. |
| Palavras-chave | Pleuropneumonia suína, RNAs reguladores, Vacina viva atenuada |
| Forma de apresentação..... | Oral |