Bioeconomia: Diversidade e Riqueza para o Desenvolvimento Sustentável
21 a 25 de outubro de 2019
Trabalho 12075
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Rayane Luiza de Carvalho |
| Orientador | ANDREA DE OLIVEIRA BARROS RIBON |
| Outros membros | Bruno Campos Silva, Lis Souza Rocha, Sérgio Barreto Queiroz Junior, TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES |
| Título | Comparação dos fenótipos de aglutinação e invasão celular de cepas de Staphylococcus aureus |
| Resumo | Staphylococcus aureus é um patógeno humano oportunista frequentemente associado a infecções hospitalares. Em bovinos, a bactéria causa mastite bovina, uma doença infecciosa que gera um processo inflamatório no úbere de vacas em lactação o que reduz na qualidade do leite. S. aureus produz vários fatores de virulência, entre eles a proteína de ligação ao fibrinogênio (Fnbp) que promove a agregação de plaquetas e invasão da bactéria a células do epitélio e endotélio do hospedeiro. Trabalhos realizados por nosso grupo mostraram que existe uma variação na sequência de nucleotídeos de fnpb entre isolados de S. aureus que causam mastite bovina. Neste estudo, avaliou-se o fenótipo de aglutinação e invasão de células MAC-T de S. aureus isolados de animais com manifestação de mastite clínica ou subclínica. Para o ensaio de aglutinação, bactérias crescidas até a fase exponencial de crescimento foram colocadas em contato com 18,5 ug/mL fibrinogênio (Sigma) e a capacidade de aglutinação foi avaliada por espectrofotometria ao longo de 2hr 30 min. Em geral, as cepas isoladas de mastite subclínica apresentaram porcentagens de aglutinação superiores quando comparadas às clínicas, revelando uma maior afinidade de Fnbp ao fibrinogênio. Para o experimento de invasão, as células bacterianas foram colocadas na presença de células bovinas MAC-T cultivadas em meio DMEM suplementado com 1% de soro bovino por 1h. Após esse tempo, adicionou-se 100 ug/mL gentamicina, as células bovinas foram lisadas e as bactérias internalizadas foram plaqueadas em meio LB sólido para determinação da UFC/mL. Não houve grande diferença entre as cepas, embora a maior internalização (1x10^5 UFC/mL) tenha sido observada para a cepa subclínica 2221. O gene que codifica Fnbp foi amplificado do genoma de algumas cepas bacterianas e fragmentos de DNA de tamanho esperado (1000-1100pb) foram visualizados em gel de agarose, os amplicons foram eluídos e enviados para sequenciamento. Isso permitirá avaliar diferenças na sequência de fnbp e sua relação com a capacidade de aglutinação da bactéria. |
| Palavras-chave | Staphylococcus aureus, aglutinação, invasão celular |
| Forma de apresentação..... | Painel |