Bioeconomia: Diversidade e Riqueza para o Desenvolvimento Sustentável
21 a 25 de outubro de 2019
Trabalho 12044
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Biologia Geral |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Gabriela Viana Siqueira |
| Orientador | LEANDRO LICURSI DE OLIVEIRA |
| Outros membros | Amanda Waack, Leonardo Henrique Souza Remer, Palloma Porto Almeida, SILVIA ALMEIDA CARDOSO |
| Título | Reconhecimento de células do sistema imune por lectina de Brassica oleracea var. Botrytis através da técnica de Citometria de Fluxo |
| Resumo | Lectinas são proteínas que possuem a característica de se ligarem de forma seletiva e reversível a carboidratos. Estão envolvidas em diversos fenômenos biológicos como endocitose, tráfego intracelular de glicoproteínas, regulação de migração, adesão celular, fagocitose e no processo de invasão por patógenos, desse modo, mostrando sua grande importância para estudos na área da imunologia. Portanto, o nosso grupo identificou e caracterizou uma lectina isolada de Brassica oleracea var. Botrytis, denominada BOL, demonstrando que esta possui especificidade de ligação a carboidratos complexos. O experimento teve como objetivo identificar a capacidade de ligação da BOL à superfície de linfócitos e monócitos. Neste contexto, a lectina foi conjugada com o reagente isotiocianato de fluoresceina (FITC) através da incubação da BOL com uma solução de FITC (1 mg/mL) na proporção de 1:50. A reação foi incubada overnight. Após esse período, a solução foi submetida à uma coluna de gelfitração com o objetivo de eliminar o excesso de reagente não conjugado a lectina. Leucócitos foram obtidos do baço de camundongos BALB/c, incubados com BOL-FITC (15 µg/mL, seguindo diluição seriada), por 15 min a 4 ºC, então lavados com PBS. As células foram analisadas em citômetro de fluxo FACSVerse™ (BD Biosciences, San Diego, CA, USA) a fim de determinar a intensidade de ligação da BOL superfície dessas células. Constatou-se que as células coradas com BOL-FITC apresentaram uma maior média de intensidade de fluorescência comparadas com as células negativas (sem marcação), deste modo, é possível inferir que a BOL foi capaz de reconhecer tanto linfócitos quanto monócitos. Há um decrescimento na capacidade de reconhecimento proporcional à diluição da lectina, sendo que somente até a concentração de 0,94 ug/mL é possível observar fluorescência correspondente ao reconhecimento das células imunes pela ligação da BOL com seu receptor em ambos os tipos celulares. A BOL liga-se duas vezes mais em monócitos do que em linfócitos, possivelmente devido a maior disponibilidade de receptores na superfície destas células. |
| Palavras-chave | lectina, citometria de fluxo, leucócitos |
| Forma de apresentação..... | Painel |