Resumo |
Microrganismos associados as raízes de plantas têm potencial para aumentar o crescimento, proteger contra patógenos e aumentar a tolerância ao estresse abiótico, tais como a baixa disponibilidade de nutrientes e de água. Esses microrganismos são capazes de promover a solubilização de nutrientes minerais, de fontes não prontamente disponíveis para as plantas, a exemplo de fósforo, além de atuarem como promotores do crescimento de planta (PGPF), a exemplo de espécies do gênero Trichoderma, uma vez que são capazes de proteger contra patógenos e aumentar a disponibilidade de nutrientes. O objetivo deste trabalho foi isolar e identificar fungos da rizosfera de Sorghum bicolor. As plantas de sorgo foram cultivadas em baldes de 18 L contendo uma mistura de solo, vermiculita e bagaço de cana (1:1:1; v:v:v), durante 90 dias, em condições naturais. O solo foi amostrado em fragmento de mata, próximo a Paracatu de Baixo, Mariana-MG, numa área não atingida pelos rejeitos da barragem de Fundão. Foi obtida uma amostra composta de solo rizosférico de cinco plantas de sorgo. Para a diluição seriada de 10-2 até 10-6, utilizou-se 10 g de solo e adicionou a 90 mL de solução salina 0,85 % (m:v), seguido por agitação em Shaker por 30 min, com diluições de 1 mL em 9 mL de solução salina. Foi plaqueado 100 uL de cada diluição em placa de Petri com meio de cultura Ágar nutriente acrescido de estreptomicina, totalizando 3 repetições de cada diluição. Do 2o e até o 7o dia foram isolados colônias com morfologias diferentes (coloração, forma de crescimento), totalizando 15 isolados. Os isolados foram preservados pelo Método Castellani e em tiras de papel em recipientes com sílica gel. Para extração do DNA, os fungos foram cultivados em meio de cultura BDA sobre papel celofane e, após 3 dias de cultivo, o micélio foi raspado e transferido para tubo com beads, do kit comercial NucleoSpin® (Macherey-Nagel Laboratories, Bethlehem, PA, USA), seguindo as instruções do fabricante. O DNA extraído teve sua quantidade e qualidade verificada por eletroforese em gel de agarose (0,8 %; v:v). A PCR foi realizada com os primers ITS1 e ITS4 e o produto foi encaminhado para sequenciamento. Para identificação dos isolados as sequências foram comparadas ao banco de dados do NCBI por meio da ferramenta Blast. Foram obtidos um total de 165 isolados:quatro de Fusarium, dois de Trichoderma; dois de Gongronella; um de Neonectria; um de Geotrichum; um de Gibberella; um de Mortierella; e um não identificado. 10) Conclui-se que o Sorghum bicolor é uma "planta isca" eficiente para recuperar microrganismos do solo de fragmento de mata de Paracatu de Baixo, Mariana-MG, e que o potencial desses biotecnológico desses microrganismos devem ser testados. |