Bioeconomia: Diversidade e Riqueza para o Desenvolvimento Sustentável
21 a 25 de outubro de 2019
Trabalho 11578
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq |
| Primeiro autor | Eduarda Melo de Abreu Vieira |
| Orientador | RAPHAEL DE SOUZA VASCONCELLOS |
| Outros membros | Juliana Rodrigues Leopoldo, Leilane Ferreira Teixeira, MARCUS VINICIUS DE ANDRADE BARROS, ROBSON RICARDO TEIXEIRA |
| Título | Análises de bioinformática e triagem de compostos inspirados no SRPIN340 em Leishmania braziliensis para o desenvolvimento de novos fármacos contra a leishmaniose tegumentar |
| Resumo | A Leishmania braziliensis é um protozoário responsável por causar a leishmaniose tegumentar, doença que acomete a mucosa e pele, podendo causar lesões desfigurantes. Os tratamentos disponíveis atualmente apresentam uma série de problemas como altos níveis de toxicidade e até mesmo casos de resistência dos parasitos. Além disso, dependem da necessidade de um profissional da área de saúde para administrar os medicamentos em ambiente ambulatorial. Sendo assim, se faz importante a busca por novos alvos moleculares para o desenvolvimento de fármacos contra essa doença. Nosso grupo de pesquisa tem trabalhado com uma enzima da família das SRPKs que poderia ser um alvo terapêutico promissor. Essa enzima já foi descrita em outros organismos, incluindo membros da família Trypanosomatidae como o Trypanosoma cruzi e já foram estudadas para o tratamento de doenças como câncer e Alzheimer, pois participam da regulação de funções importantes na célula como o processamento de mRNA e progressão do ciclo celular. O SRPIN340 é um inibidor bem estabelecido da SRPK de humano. A partir da estrutura dessa molécula, uma série de outros compostos baseados nesse inibidor foram sintetizados e testados na tentativa de inibir a proteína do parasito em estudo e leva-lo à morte. Com base nisso, o trabalho teve como objetivo fazer uma triagem de compostos inspirados no SRPIN340, sintetizados pelo professor Robson Ricardo Teixeira, do Departamento de Química da Universidade Federal de Viçosa, em L. braziliensis analisando a viabilidade celular dos parasitos após o tratamento. Para isso, uma busca por proteínas homólogas à hSRPK foi feita utilizando o banco de dados TrytripDB e a sequência encontrada foi analisada no PFAM e alinhada com outras cinases já descritas. Para a realização do teste in vitro, L. braziliensis foi cultivada em meio Grace’s e 4x106 promastigotas na fase log de crescimento foram colocados em cada poço da microplaca. Os compostos foram adicionados em quadruplicata na concentração final de 10µM e cada placa foi incubada à 25ºC por 24h. O experimento foi realizado em quadruplicata interna, triplicata biológica e atividade citotóxica e leishmanicida foi avaliada pelo método da resazurina. As análises no PFAM e de alinhamento mostraram que, assim como outras SRPKs, a LbSRPK possui dois domínios cinases conservados separados por uma região espaçadora não conservada. As análises demonstram também a homologia entre a SRPK de T. cruzi e de L. braziliensis, indicando sua presença no parasito. O teste dos compostos em promastigotas demonstrou que o composto MVAB16 foi o que mais reduziu a viabilidade celular, restando menos de 40% de parasitos vivos em 24h. Dessa forma, esperamos avançar mais nesse estudo por meio de outros ensaios com o composto MVAB16, como por exemplo repetir esse mesmo ensaio prolongando o tempo para 48h, analisar a citotoxicidade do composto em macrófagos e testar o composto em amastigotas intracelulares para verificar e comprovar sua eficácia. |
| Palavras-chave | Leishmaniose, cinase, alvo molecular |
| Forma de apresentação..... | Painel |