Resumo |
Mycoplasma hyopneumoniae é a bactéria responsável pela Pneumonia Enzoótica Suína. Causa diminuição do desempenho reprodutivo e leva à grandes prejuízos. A vacinação é considerada mais eficaz na profilaxia desta doença; existem vacinas importadas que usam cepas não isoladas no Brasil que permitem uma proteção parcial mas, se observam falhas associadas à falta de proteção cruzada com as cepas de campo. Por isso, o objetivo deste projeto é desenvolver vacinas de maior potencial imunológico contra o M. hyopneumoniae. Inicialmente, foram desenhadas três quimeras proteicas Q1, Q2 e Q3 a partir das proteínas potencialmente imunogênicas de M. hyopneumoniae MHP418, MHP372, MHP199, P97 e MHP0461, esses genes foram desenhados usando programas de identificação de epítopos indutores de resposta imune. O ensaio de imunização foi realizado com 48 camundongos BALB/c machos com idade entre 4-6 semanas e estes foram divididos em oito grupos de seis animais. Estes foram inoculados, via subcutânea, com 3 doses das formulações proteicas e controles, em intervalos de 15 dias. Foram coletadas amostras de sangue nos dias 0, 15, 30 e 45, e o soro foi avaliado para presença de anticorpos específicos. Após 45 dias, os animais foram eutanasiados e tiveram o baço removido para fazer a técnica de linfoproliferação. Foram mensurando níveis de IgG, IgG1 e G2a por ELISA. Também foi feita avaliação da indução de anticorpos por Imuno Blot, onde os soros foram avaliados quanto a reatividade contra proteínas do MHJ. A avaliação do soro quanto a indução de anticorpos murinos que reagem a proteínas do MHJ obtiveram os seguintes resultados: a técnica de ELISA mostrou indução de IgG específicos nos camundongos imunizados com Q3 a partir do dia 30 após imunização e nos grupos Q2 e Q1 a partir do dia 45. Já os animais dos grupos Q1, Q2 e Q3 e o grupo imunizado com a mistura de quimeras apresentaram IgG1 específicos a partir do dia 30. Animais do grupo Q3 apresentaram maiores níveis de anticorpos IgA. Não houve diferença estatistica nos níveis de anticorpos da subclasse IgG2a em nenhum grupo, com excessão do imunizado com o MHJ. Portanto, as proteínas apresentaram capacidade de induzir resposta imunológica em modelo murino tendo induzido anticorpos específicos contra proteínas do M. hyopneumoniae. |