Resumo |
A formação de biofilme pelas comunidades microbianas, principalmente bactérias redutoras de sulfato (BRS), causam prejuízos para a indústria petrolífera, como corrosão de tubulações e acidulação do óleo. Para minimizar esses efeitos, novas tecnologias veem sendo desenvolvidas para controle e prevenção da formação de biofilme, como a prospecção de biocidas, compostos químicos que inibem o crescimento de microrganismos. Neste âmbito, as xantenodionas, compostos que apresentam característica antibacteriana e antiproliferativa, representam uma alternativa para o problema. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de xantenodionas sobre a formação de biofilme de água de produção. Para os ensaios experimentais, microcosmos foram montados em placas MBECTM (Innovotech) de 96 poços, que possuem pinos na tampa nos quais ocorrerá a adesão das células do biofilme. Foram adicionados 198 µL da água de produção e 2 µL de xantenodionas (0,004; 0,008; 0,016 e 0,032 µM), de glutaraldeído 4,24 M (controle positivo) ou DMSO 0,004 µM (controle negativo). Para simular a presença de petróleo na água de produção, uma ponteira foi imersa em óleo cru e mergulhada em cada um dos 96 poços da placa. A montagem das placas foi realizada em câmara de anaerobiose e transferidas para jarra de anaerobiose para incubação a 30°C. Todos tratamentos foram realizados em triplicata. Após 6 e 12 dias de incubação os três pinos correspondentes a cada triplicata foram transferidos para tubos contendo 200 µL de tampão PBS. O preparo das amostras para contagem por citometria de fluxo envolveu a fixação e coloração das células. Para fixação, os pinos foram transferidos para uma solução de paraformaldeído 4 % e para coloração foram transferidos para uma solução de iodeto de propídeo e isotiocianato de fluoresceína nas concentrações de 2 μg/μl e 0,200 μg/μl, respectivamente. Após esses procedimentos os pinos de cada triplicata foram transferidos para tubos com 200 µL de tampão PBS e retirados da câmara de anaerobiose. Após a sonicação dos tubos para desestabilização do biofilme e solubilização das células, os pinos foram descartados. A contagem das células foi realizada em citômetro de fluxo Accuri C6 (BD) e a leitura determinada a partir de números de eventos com volume fixo de 50 μL. Observamos que o aumento das concentrações das xantenodionas não reduziu a contagem das células viáveis de biofilme de água de produção, enquanto o tratamento com glutaraldeído foi efetivo e apresentou baixo número de células viáveis. Desta forma, as xantenodionas, nas concentrações avaliadas, não foram capazes de controlar a formação de biofilme por microrganismos da água de produção de petróleo. |