Bioeconomia: Diversidade e Riqueza para o Desenvolvimento Sustentável
21 a 25 de outubro de 2019
Trabalho 11416
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Veterinária |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Raquel dos Santos Oliveira Almeida |
| Orientador | MARIA APARECIDA SCATAMBURLO MOREIRA |
| Outros membros | Jéssica Lobo Albuquerque, Leonardo Moises Sales Bueno, Magna Corôa Lima, Mariana de Barros |
| Título | Correlação do perfil de multirresistência com a presença de plasmídeos em Escherichia coli isoladas de mastite caprina |
| Resumo | A resistência antimicrobiana em E. coli foi relatada em todo mundo, sendo preocupante pois é uma bactéria Gram-negativa comum em seres humanos e animais, podendo ocorrer a transmissão pelo ambiente e produtos de origem animal, principalmente os genes de resistência localizados em elementos moveis. O objetivo foi detectar a presença de plasmídeos em E. coli isolados de mastite caprina, correlaciona-los com o perfil de multirresistência e com o tipo de mastite. Foram usadas 12 E. coli pertencentes à bacterioteca do LDBAC/DVT/UFV (5 mastite clínica e 7 subclínica). O perfil de resistência foi avaliado pelo método de difusão em disco, Kirby-Bauer, com 19 antimicrobianos usados no tratamento. O índice de resistência múltipla (IRMA) foi calculado pela razão entre o número de classes dos antimicrobianos presentes no perfil de resistência de cada isolado e o número total de classes testadas (10), considerando que >0,3 possui potencial de transmissão desses genes. A presença ou ausência de plasmídios foi testada para os isolados que apresentaram IRMA >0,3. Foi realizada a extração de plasmídeos (kit Fast-n-Easy, CELLCO©), e análise eletroforética. A cura de plasmídeos foi realizada apenas para o isolado que apresentou maior número de resistência no seu perfil usando 10 passagens da cultura em caldo BHI acrescido de Dodecil Sulfato de Sódio (SDS) na concentração final de 10% e incubada a 37°C overnight. Após a última passagem, a cultura, em duplicatas, foi diluída em salina 0,85% para 103, 104 e 105 UFC/ML e espalhada em placas contendo ágar BHI e depois incubadas a 37°C overnight. Sob uma grade enumerada de 1 a 52, foram repassadas 104 colônias isoladas para placas contendo ágar BHI e incubadas a 37°C overnight. Com base no perfil de resistência, as 104 subculturas foram repassadas para placas contendo BHI mais os respectivos antimicrobianos na concentração Kirby Bauer. A subcultura que não cresceu em placa com antimicrobiano era submetida novamente a extração e analise eletroforética para verificar perda de plasmídeo. Para análise estatística foi usado teste de Fisher para as categorias: presença de plasmídeo, tipo de mastite e perfil de resistência a 5%. Das 12 amostras, seis apresentaram IRMA >0,3 e destas, quatro isolados apresentaram plasmídeos e após a cura verificou-se a perda desses plasmídeos e alterações no perfil de resistência. Antes da cura o isolado era resistente a ampicilina, gentamicina, neomicina, ciprofloxacina, enrofloxacina, cefalexina, ceftiofur, cefoperazona, cefepime, tetraciclina e claritromicina; intermediário a ampicilina/colistina e imipenem; e sensível a marbofloxacina, sulfazotrim, novabiocina, florfenicol, clorafenicol e azitromicina. Após a cura, mostrou-se sensível aos antimicrobianos resistentes anteriormente. Não teve diferenças estatísticas entre as categorias analisadas. Conclui-se que E. coli com perfil de multirresistência isoladas da mastite caprina possuem potencial de transmissão de genes de resistência. |
| Palavras-chave | elementos moveis, leite, ruminantes |
| Forma de apresentação..... | Painel |