Ciência para a Redução das Desigualdades
15 a 20 de outubro de 2018
Trabalho 9912
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Dayane Frances Rezende Marques |
| Orientador | PEDRO AUGUSTO BRAGA DOS REIS |
| Outros membros | ELIZABETH PACHECO BATISTA FONTES, Hanna Durso Neves Caetano, Larissa Pereira Miguel, Luiz Fernando de Camargos |
| Título | Obtenção de um evento geneticamente modificado (GM) pela superexpressão de ATAF2 em Arabidopsis thaliana |
| Resumo | Plantas são constantemente submetidas a variações ambientais e a condições adversas. Em função disso, apresentam mecanismos de resposta que são imediatamente ativados diante de uma situação de estresse. Os mecanismos sofisticados de sinalização ativados promovem a expressão/repressão de genes responsivos a diferentes condições de estresse. Uma resposta adaptativa ativada é a via de morte celular mediada por proteínas NRP (N-rich protein) /DCD (developmental and cell death domain). Os genes NRPs podem ser induzidos pelo transfator GmERD15 que é capaz de se ligar diretamente no promotor de NRP-B e ativar a sua transcrição. NRPs, atuando downstream, são capazes de promover o aumento da expressão dos genes GmNAC81 e GmNAC30, os quais interagem e promovem um aumento da expressão do gene VPE (Vacuolar Processing Enzyme) ativando, assim, o processo de morte celular. Embora primeiramente identificada em soja, esta via se apresenta conservada entre as espécies. Com base nesta conservação, vários genes homólogos em Arabidopsis são alvos para o estudo desta via de sinalização. ATAF2 foi identificado como um possível homólogo do gene GmNAC30 em Arabidopsis através de homologia de sequência, por predições de bioinformática. ATAF2 atua em respostas ao estresse biótico, abiótico e ao desenvolvimento vegetal. Em relação às vias bióticas, ATAF2 está associado à indução de respostas a patógenos, sendo expresso em resposta a ferimentos ao tecido e à infecção patogênica. Entretanto, o seu papel na resposta a estresses abióticos ainda é pouco elucidado. Por apresentar uma alta homologia com GmNAC30, o qual está envolvido em respostas a estresse abiótico e processos de morte celular, ATAF2 também pode participar de sinalizações de respostas a estas condições. Por isso, entender os mecanismos de atuação de ATAF2 é de grande interesse para a obtenção de plantas tolerantes a diferentes tipos de estresse. Assim, o presente trabalho visa compreender o papel de ATAF2 em Arabidopsis em resposta a estresses abióticos, por meio de ensaios de superexpressão e de genética reversa. Para estudos de genética reversa, linhagens nocautes para ATAF2 foram obtidas do TAIR e confirmadas por genotipagem. Para a caracterização funcional, a região codificante de ATAF2 foi amplificada por PCR a partir do cDNA de Arabidopsis e o inserto foi clonado no vetor de expressão em plantas pEARLEY103, gerando a construção 35S:ATAF2-GFP. A expressão de ATAF2 fusionada a GFP foi avaliada por meio de expressão transiente em Nicotiana benthamiana. A localização subcelular foi determinada por meio de microscopia confocal, confirmando ser uma proteína nuclear, consistente com a atuação dos fatores de transcrição. A construção de DNA 35S:ATAF2-GFP foi utilizada para ensaios de complementação e superexpressão de ATAF2 em linhagens de Arabidopsis ataf2 e Col-0, transformadas por mergulho do pendão floral. As plantas transformadas geradas serão utilizadas em ensaios de caracterização funcional de ATAF2. |
| Palavras-chave | ATAF2, Arabidopsis, superexpressão |
| Forma de apresentação..... | Painel |