Ciência para a Redução das Desigualdades
15 a 20 de outubro de 2018
Trabalho 9711
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Biologia Geral |
| Bolsa | Outros |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | Outros |
| Primeiro autor | Clara Nogueira Laguardia |
| Orientador | SERGIO OLIVEIRA DE PAULA |
| Outros membros | Jéssica Duarte da Silva, Josicelli Souza Crispim, Larissa Cristina Araújo, Roberto Sousa Dias |
| Título | Isolamento e caracterização de Desulfovibrio indonesiensis P37SLT |
| Resumo | As Bactérias Redutoras de Sulfato (BRS) compõem um grupo de organismos que reduzem sulfato, produzindo sulfeto de hidrogênio (H2S). Além da toxicidade do gás, destaca-se também o efeito de biocorrosão de metais, que gera grandes problemas na indústria petrolífera. Por isso, é necessário controlar sua população e uma das alternativas é o uso de bacteriófagos. Bacteriófagos são vírus que infectam bactérias, impedindo a sua proliferação por meio do ciclo lítico. Esse trabalho objetiva o isolamento e caracterização de uma BRS presente em amostra de uma plataforma de extração de petróleo para posterior uso no isolamento de bacteriófagos. O isolamento foi realizado a partir de uma amostra proveniente de um tanque slop de uma plataforma localizada na Bacia de Campos, Rio de Janeiro, Brasil. A amostra foi inoculada em meio Postgate C e cultivadas à 30°C em tubos hungate. O isolamento foi realizado por meio da técnica de estria em meio Postgate C sólido em câmara de anaerobiose. Posteriormente a colônia isolada foi inoculada em meio Postgate C e incubado a 30°C, sem agitação, para posteriores análises da sua curva de crescimento. O isolado foi ainda analisado por coloração de Gram e microscopia eletrônica de transmissão, para determinação do Gram e da morfologia, respectivamente. Para verificação da espécie bacteriana foi realizado a extração de DNA e sequenciamento do gene 16S. A árvore filogenética foi montada por meio do programa MEGA6 com uso do método neighbor-joining após alinhamento com sequências de 16S relacionadas. Posteriormente, este isolado bacteriano foi utilizado para o isolamento de bacteriófagos, pelo método de dupla camada. Na etapa de isolamento foram selecionadas duas colônias que apresentavam coloração escura devido à precipitação de ferro após redução do sulfato (FeSO4), que foram identificadas como P37 1 e P37 2. Ambos os isolados foram classificados como Gram-negativos e o isolado 2, cuja microscopia de transmissão permitiu a caracterização da forma vibrio, foi selecionado para posteriores ensaios. Pela análise do gene 16S e da árvore filogenética, é possível identificar que o isolado é pertencente à espécie Desulfovibrio indonesiensis, com 99,79% de identidade com o gene 16S de D. indonesiensis OP12. Ao analisar a curva de crescimento desse isolado, podemos notar que a fase exponencial se inicia com 24h de incubação e se estende até aproximadamente 65h, quando se observa a queda do crescimento bacteriano. Esse passo é de grande importância, já que a fase exponencial é utilizada no processo de isolamento de bacteriófagos líticos. Neste processo de isolamento, observamos placas de lise, mas sem sucesso na propagação do fago. Em resumo, este estudo realizou o isolamento de uma BRS, cujos resultados de caracterização são condizentes com a espécie D. indonesiensis. Este isolado, caracterizado como P37SLT, está sendo utilizado por nosso grupo de pesquisa em processos de isolamento de bacteriófagos, inicialmente realizados neste estudo. |
| Palavras-chave | BRS, bacteriófagos, isolamento. |
| Forma de apresentação..... | Painel |