Resumo |
A lisozima de clara de ovo apresenta aplicação industrial na indústria alimentícia e farmacêutica devido às suas propriedades antimicrobianas. Considerando as várias operações unitárias para sua purificação, a cromatografia líquida por afinidade se destaca principalmente pela alta seletividade para com a molécula a ser capturada, contribuindo para a redução do número de etapas no processo de separação. A cromatografia líquida por afinidade (CLAF) é um método muito efetivo para purificação de biomoléculas. Comparado com outras técnicas, tais como cromatografia por troca iônica ou interação hidrofóbica, precipitação e ultrafiltração, a vantagem da CLAF é a possibilidade se separação contínua, seleção específica do soluto e alta produtividade. Entretanto, o uso da técnica de CLAF para purificação industrial de biomoléculas, tal como no caso da lisozima, não é atualmente frequentemente empregada, principalmente devido ao alto custo para sua implementação. Os ligantes clássicos para uma dada biomolécula alvo incluindo anticorpos, drogas, metais e pigmentos são de custo muito elevados e instáveis. Recentemente, foi relatado por Quan et al (2008) a interação específica entre lisozima e o composto tris(hydroxymethyl) aminomethane (Tris). Neste trabalho, foi utilizado um criogel supermacroporoso de poliacrilamida e modificado quimicamente pela incorporação de moléculas de tris hidroximetil aminometano na captura direta de lisozima de clara de ovo. O criogel apresentou estrutura esponjosa, com poros de tamanhos variados e interconectados, com porosidade igual a 0,90, o que contribui para a baixa resistência fluxo. A permeabilidade ao fluxo foi igual a 5,9 x 10-13 m2 e os coeficientes de dispersão axial, em diferentes velocidades superficiais do líquido, situaram-se entre 10-8 e 10-5 m2/s. Avaliou-se o efeito do pH no processo de captura de lisozima a partir da clara de ovo e verificou-se que o pH 7,5 foi o mais adequando, tendo em vista a massa de lisozima adsorvida (31,20 mg/g) e os maiores valores de atividade específica (62207 U/mg) nas amostras desse pH. |