Ciência para a Redução das Desigualdades
15 a 20 de outubro de 2018
Trabalho 10588
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Agrárias |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros |
| Primeiro autor | Júlia Coutinho Andrade |
| Orientador | MARIA CRISTINA BARACAT PEREIRA |
| Outros membros | Camilo Jose Ramirez Lopez, Cleonice Aparecida Salgado, Lavínia Martins da Silva, PAULO ROBERTO GOMES PEREIRA |
| Título | Extração, purificação e identificação de peptídeos antimicrobianos de folhas de Solanum melongena para uso biotecnológico |
| Resumo | Os peptídeos antimicrobianos (AMPs) são moléculas com potencial para defesa, presentes em organismos multicelulares como primeira linha de defesa. Podem apresentar atividade contra bactérias, fungos, vírus encapsulados, nematóides e também contra células cancerosas. Os AMPs podem ser produzidos de forma constitutiva ou podem ser expressos de forma induzida, após desafios. Agem sobre patógenos especialmente sobre a membrana plasmática; por não ser um processo enzimático, o desenvolvimento de resistência é reduzido. AMPs de plantas são moléculas promissoras na identificação de agentes de defesa para o controle microbiano. Solanum melongena, berinjela, é uma planta medicinal que pertence à família Solanaceae. Estudos mostram que essa planta contém propriedades medicinais como alcalinizante, calmante, digestiva, oxidante e diurética. Além disso, seu uso pode ser indicado para reduzir a ação das gorduras no fígado, inflamação dos rins e da uretra, artrite, colesterol, emagrecimento e diabetes. Considerando a potencialidade de moléculas presentes na planta de berinjela, este trabalho se destina à extração e caracterização de peptídeos com atividade antimicrobiana, antifúngica e nematicida a partir de extratos obtidos das folhas maduras. Com as folhas coletadas, foram preparados extratos em ácido acético 10% (v/v), os extratos obtidos foram submetidos ao aquecimento seletivo a 80°C por 15 minutos e SDS-PAGE de duas fases evidenciou a presença de bandas peptídicas. Como as bandas apresentaram-se não purificadas, as amostras estão sendo submetidas à cromatografia de exclusão molecular em coluna Waters Spherisorb SCX (80Å, 5 µm, 4,6 mm X 250 mm) e equipamento HPLC semi-preparativo (Waters Corporation). Frações enriquecidas em peptídeos serão a seguir submetidas à análise em espectrometria de massas (MS) do tipo MALDI-TOF/TOF, em equipamento Ultraflex III (Bruker Daltonics), no Núcleo de Análises de Biomoléculas da UFV, usando matriz ácido α-ciano-4-hidroxicinâmico em placa de aço MTP Anchor Chip TM 600/384 TF (Bruker Daltonics), sem redução e alquilação, para confirmar a presença do peptídeo inibidor de carboxipeptidase (4,2 kDa) e de outros peptídeos. Os resultados MS1 e MS2 serão também analisados visando identificação de AMPs ainda não detectados. Novas análises MS1 e MS2 em MALDI-TOF/TOF também serão realizadas em amostras reduzidas e alquiladas, e novas extrações e purificações serão realizadas visando obter frações de peptídeos purificados para estudos estruturais e funcionais para aplicação biotecnológica. (Apoio financeiro: FAPEMIG, CNPq, FINEP e CAPES. Apoio técnico: DBB/UFV, NuBioMol/UFV e BIOAGRO/UFV). |
| Palavras-chave | Peptídeos, defesa de plantas, espectrometria de massas |
| Forma de apresentação..... | Painel |