Resumo |
Uma das novas doenças com maior potencial de causar danos importantes à cultura do eucalipto (Eucalyptus spp.) é a seca-de-ponteiros, causada pela bactéria Erwinia psidii. O diagnóstico correto e rápido dessa doença é fundamental, principalmente pelo fato da bactéria poder ser transmitida por mudas assintomáticas. Considerando a necessidade de ter um método confiável, simples e rápido para detecção de E. psidii em plantas infectadas, desenvolveu-se a partir de um anticorpo policlonal específico para E. psidii um método sorológico para identificação da bactéria. Para isso, foi produzido um anticorpo policlonal específico para E. psidii, e em seguida desenvolvido um teste de aglutinação para identificação da bactéria. O teste reagiu positivamente para E. psidii e foi negativo para outras duas fitobactérias do eucalipto, Ralstonia solanacearum e Xanthomonas axonopodis. Entretanto, mais isolados de E. psidii e de outras bactérias endofíticas do eucalipto devem ser testadas para confirmar a eficácia do teste. Assim, o objetivo principal deste trabalho foi validar o teste sorológico quanto à sensibilidade e especificidade. Para isso, o teste sorológico foi testado em 131 isolados de E. psidii oriundos do eucalipto de diferentes regiões do Brasil; dois isolados de E. psidii oriundos da goiabeira (Psidium guajava); duas bactérias endofíticas de Eucalyptus spp.; e quatro bactérias não patogênicas de Eucalyptus spp., mas filogeneticamente próximas ao gênero Erwinia. O antissoro foi positivo para todas E. psidii, oriundas de eucalipto ou da goiabeira. Reações cruzadas não foram detectadas nas bactérias não patogênicas testadas, sendo o limite de detecção do teste igual a 105 UFC/mL. A sensibilidade relativa e a especificidade do teste de aglutinação foram de 100%, sendo semelhantes às do isolamento em placa e reação em cadeia da polimerase (PCR) usando primers específicos (Ep2L-Ep2R). Os resultados demostram que o teste de aglutinação é rápido, preciso, tem um baixo custo e pode ser usado para o diagnóstico rotineiro e preciso de E. psidii. O teste imunocromatográfico está em desenvolvimento. |