ISSN | 2237-9045 |
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Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
Nível | Graduação |
Modalidade | Pesquisa |
Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
Área temática | Ciências Agrárias |
Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
Bolsa | CNPq |
Conclusão de bolsa | Não |
Apoio financeiro | CNPq, FAPEMIG, Outros |
Primeiro autor | Gabriele Corrêa da Rocha |
Orientador | MARIA GORETI DE ALMEIDA OLIVEIRA |
Outros membros | Adriana Maria Patarroyo Vargas, Gabriela Ludovino França, Gláucia Cordeiro, Samuel Lessa Barbosa |
Título | Caracterização cinética de enzimas tripsina-like de Anticarsia gemmatalis utilizando diferentes substratos tripeptidil |
Resumo | Uma das principais formas diretas de defesa das plantas contra o ataque de insetos é mediada pela Via das Lipoxigenases, uma vez que por ela ocorre a produção de ácido jasmônico, que ativa os genes que expressam inibidores de proteases. Estes inibidores podem se ligar com as proteases digestivas dominantes de insetos, que se alimentam da planta hospedeira, prejudicando sua digestão e retardando o crescimento e desenvolvimento larval em algumas espécies de insetos incluindo as lepidópteras. O estudo da cinética enzimática é uma ferramenta promissora para o entendimento da estrutura e função das serino-proteases digestivas do inseto. Os parâmetros cinéticos permitem uma melhor compreensão dos centros ativos e dos mecanismos de ação destas enzimas, desvendando quais tipos de inibidores deverão ser produzidos pela planta ou aplicados a ela para serem inibidores do complexo sistema de proteases digestivas do inseto. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar a caracterização cinética dos serino-proteases intestinais da lagarta-da-soja, Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Noctuidae), utilizando diferentes substratos tripeptidil. Para isso, o extrato bruto intestinal de lagartas (n= 50), entre o quarto e quinto instar, foi purificado em coluna de afinidade de p-aminobenzamidina agarose utilizando sistema Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC). Os parâmetros cinéticos foram calculados por regressão não-linear utilizando o programa Sigma Plot 12.0. Os parâmetros cinéticos estimados para as serino-proteases do intestino médio da A. gemmatalis utilizando os substratos cromogênicos foram aparentes, considerando que o sistema é semi-purificado. Os resultados apresentados indicam forte preferência por arginina em P1 em detrimento de lisina. Avaliando os valores de KM observa-se maior afinidade do substrato Val-Gly-Arg-pNA pelo centro ativo da enzima. Pode-se afirmar que para o inseto lepidóptera A. gemmatalis a preferência de hidrólise das tripsinas-like intestinais é por substratos que contenham Arg em P1. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG, INCT-Interação Planta Inseto |
Palavras-chave | Interação inseto-planta, Lagarta-da-soja, Parâmetros cinéticos |
Forma de apresentação..... | Painel |