Ciência para a Redução das Desigualdades
15 a 20 de outubro de 2018
Trabalho 10474
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Agrárias |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros |
| Primeiro autor | Wassali Valadares de Sousa |
| Orientador | MARIA CRISTINA BARACAT PEREIRA |
| Outros membros | Camilo Jose Ramirez Lopez, EDVALDO BARROS, Lavínia Martins da Silva |
| Título | Extratos nativos de sementes de soja sob condições de stress para análise funcional de peptídeos de defesa |
| Resumo | Diversos setores industriais despertam interesse em peptídeos antimicrobianos (AMPs) como agentes para desenvolver compostos de defesa para a proteção de sementes armazenadas e plantas em cultivo protegido. Os AMPs são membros da defesa constitutiva e induzida de plantas. Em função da alta produção e facilidade de obtenção, as sementes de soja podem ser fonte importante de AMPs para aplicação comercial. Estudos anteriores desenvolvidos no Laboratório de Proteômica e Bioquímica de Proteínas/DBB/UFV evidenciaram a presença de peptídeos em sementes de soja (Glycine max [L.] Merrill, var. UFV16) germinadas por 48h (SS-48), apontando atividades contra as bactérias fitopatogênicas Ralstonia solanacearum (Gram-negativa) e Clavibacter michiganensis ssp. michiganensis (Gram-positiva), despertando interesse biotecnológico. Contudo, pouco se tem conhecimento quanto à identidade e aos mecanismos de ação destes AMPs. O objetivo deste projeto é identificar e caracterizar estes AMPs das sementes germinadas de soja. Para identificar os AMPs, estudos foram realizados usando-se frações da amostra de soja germinadas precipitadas com ácido tricloroacético e acetona, mas as análises por eletroforese bidimensional identificaram apenas proteínas de massas maiores que 20 kDa. Para identificar frações peptídicas (até 10 kDa), os extratos nativos da amostra estão sendo analisados quanto ao perfil eletroforético monodimensional e bidimensional, e também separação em meio líquido, seguindo-se análises por espectrometria de massas. Sementes de soja germinadas foram reunidas em 3 grupos (contendo 5 sementes por grupo/repetição), foram pulverizadas com nitrogênio líquido e maceradas com tampão Tris-HCl contendo inibidores de protease. O extrato foi homogeneizado em banho de gelo e centrifugado, o sobrenadante coletado, e as amostras quantificadas pelo método de Bradford. SDS-PAGE 14% mostrou bandas intensas na região entre 6 e 30 kDa, de interesse. Realizou-se aquecimento seletivo das amostras e o gel monodimensional apontou melhor qualidade no perfil eletroforético. Cromatografia de exclusão molecular indicou presença de peptídeos e proteínas de baixas massas nas frações eluídas entre 25 e 28 min. Os peptídeos e as proteínas estão em processo de identificação por MALDI-TOF/TOF (MS1 e MS2) e ferramentas computacionais ajustadas a moléculas pequenas. Espera-se resultados também para gerar conhecimento da fisiologia de defesa da soja por peptídeos, além dos AMPs para desenvolver agentes de defesa de plantas. (Apoio financeiro: FAPEMIG, CNPq, CAPES e FINEP. Apoio e técnico: DBB/UFV, NUBIOMOL/UFV e BIOAGRO/UFV). |
| Palavras-chave | Peptídeos antimicrobianos, soja, extrato nativo. |
| Forma de apresentação..... | Oral |