Ciência para a Redução das Desigualdades

15 a 20 de outubro de 2018

Trabalho 10435

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Agrárias
Área temática Ciências Agrárias
Setor Departamento de Fitopatologia
Bolsa FAPEMIG
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros
Primeiro autor Vítor Morais de Sousa
Orientador ACELINO COUTO ALFENAS
Outros membros Claudia Nohemy Montoya Estrada, LEANDRO LICURSI DE OLIVEIRA, Lúcio Mauro da Silva Guimarães
Título Desenvolvimento de um teste de aglutinação para o diagnóstico de Erwinia psidii em Eucalyptus spp.
Resumo A seca-de-ponteiro e murcha, causada pela bactéria Erwinia psidii é atualmente uma das doenças emergentes mais severas em Eucalyptus spp. no Brasil. O diagnóstico da doença é difícil porque muitas vezes a bactéria está de forma latente na planta, não causando sintomas. Normalmente, o diagnóstico preciso depende do isolamento da bactéria a partir de amostras de plantas e do uso de técnicas moleculares, que necessitam de equipamentos dispendiosos e mão de obra especializada. Considerando a necessidade de um método confiável, rápido e simples para a detecção do patógeno, principalmente em plantas assintomáticas, o objetivo deste estudo foi produzir um anticorpo policlonal específico para E. psidii e desenvolver um teste de aglutinação. Para a obtenção dos anticorpos um coelho macho da raça Nova Zelândia foi imunizado com 100 μg de antígeno emulsificado de um isolado de E. psidii. Este procedimento foi repetido aos 21 e 40 dias após a primeira imunização. Anticorpos policlonais purificados obtidos do coelho foram dialisados em tampão fosfato por 4 h em câmara fria a 4 ° C e sua concentração ajustada para 1 mg / mL, sendo armazenada a 4 ºC. Em seguida, culturas bacterianas de E. psidii e de outros dois patógenos bacterianos do eucalipto, X. axonopodis e R. solanacearum, armazenadas em glicerol a 30% (-80 °C) foram semeadas em meio sólido 523 e as placas foram incubadas durante 48 h a 28 ° C. Posteriormente, uma suspensão bacteriana foi preparada com uma colônia individual em 100 µL de água destilada estéril. Para realizar o teste, 10 μL da suspensão bacteriana e 10 μL do anticorpo foram colocados em uma lâmina de vidro e misturados manualmente por 5 min até a formação de pequenos ou maiores aglomerados. O anti-soro Anti-Ep reagiu positivamente apenas contra o isolado E. psidii testado e foi negativo para outros dois patógenos bacterianos do eucalipto, Ralstonia solanacearuam e Xanthomonas axonopodis. A próxima etapa será validar o teste sorológico contra uma ampla gama de isolados de E. psidii e de outras bactérias endofíticas do eucalipto.
Palavras-chave Psidium guajava, anticorpos policlonais, dieback
Forma de apresentação..... Oral
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