| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Ciências Agrárias |
| Setor | Departamento de Fitopatologia |
| Bolsa | FAPEMIG |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros |
| Primeiro autor | Vítor Morais de Sousa |
| Orientador | ACELINO COUTO ALFENAS |
| Outros membros | Claudia Nohemy Montoya Estrada, LEANDRO LICURSI DE OLIVEIRA, Lúcio Mauro da Silva Guimarães |
| Título | Desenvolvimento de um teste de aglutinação para o diagnóstico de Erwinia psidii em Eucalyptus spp. |
| Resumo | A seca-de-ponteiro e murcha, causada pela bactéria Erwinia psidii é atualmente uma das doenças emergentes mais severas em Eucalyptus spp. no Brasil. O diagnóstico da doença é difícil porque muitas vezes a bactéria está de forma latente na planta, não causando sintomas. Normalmente, o diagnóstico preciso depende do isolamento da bactéria a partir de amostras de plantas e do uso de técnicas moleculares, que necessitam de equipamentos dispendiosos e mão de obra especializada. Considerando a necessidade de um método confiável, rápido e simples para a detecção do patógeno, principalmente em plantas assintomáticas, o objetivo deste estudo foi produzir um anticorpo policlonal específico para E. psidii e desenvolver um teste de aglutinação. Para a obtenção dos anticorpos um coelho macho da raça Nova Zelândia foi imunizado com 100 μg de antígeno emulsificado de um isolado de E. psidii. Este procedimento foi repetido aos 21 e 40 dias após a primeira imunização. Anticorpos policlonais purificados obtidos do coelho foram dialisados em tampão fosfato por 4 h em câmara fria a 4 ° C e sua concentração ajustada para 1 mg / mL, sendo armazenada a 4 ºC. Em seguida, culturas bacterianas de E. psidii e de outros dois patógenos bacterianos do eucalipto, X. axonopodis e R. solanacearum, armazenadas em glicerol a 30% (-80 °C) foram semeadas em meio sólido 523 e as placas foram incubadas durante 48 h a 28 ° C. Posteriormente, uma suspensão bacteriana foi preparada com uma colônia individual em 100 µL de água destilada estéril. Para realizar o teste, 10 μL da suspensão bacteriana e 10 μL do anticorpo foram colocados em uma lâmina de vidro e misturados manualmente por 5 min até a formação de pequenos ou maiores aglomerados. O anti-soro Anti-Ep reagiu positivamente apenas contra o isolado E. psidii testado e foi negativo para outros dois patógenos bacterianos do eucalipto, Ralstonia solanacearuam e Xanthomonas axonopodis. A próxima etapa será validar o teste sorológico contra uma ampla gama de isolados de E. psidii e de outras bactérias endofíticas do eucalipto. |
| Palavras-chave | Psidium guajava, anticorpos policlonais, dieback |
| Forma de apresentação..... | Oral |