ISSN |
2237-9045 |
Instituição |
Universidade Federal de Viçosa |
Nível |
Graduação |
Modalidade |
Pesquisa |
Área de conhecimento |
Ciências Agrárias |
Área temática |
Ciências Agrárias |
Setor |
Departamento de Fitopatologia |
Bolsa |
FAPEMIG |
Conclusão de bolsa |
Não |
Apoio financeiro |
CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros |
Primeiro autor |
Vítor Morais de Sousa |
Orientador |
ACELINO COUTO ALFENAS |
Outros membros |
Claudia Nohemy Montoya Estrada, LEANDRO LICURSI DE OLIVEIRA, Lúcio Mauro da Silva Guimarães |
Título |
Desenvolvimento de um teste de aglutinação para o diagnóstico de Erwinia psidii em Eucalyptus spp. |
Resumo |
A seca-de-ponteiro e murcha, causada pela bactéria Erwinia psidii é atualmente uma das doenças emergentes mais severas em Eucalyptus spp. no Brasil. O diagnóstico da doença é difícil porque muitas vezes a bactéria está de forma latente na planta, não causando sintomas. Normalmente, o diagnóstico preciso depende do isolamento da bactéria a partir de amostras de plantas e do uso de técnicas moleculares, que necessitam de equipamentos dispendiosos e mão de obra especializada. Considerando a necessidade de um método confiável, rápido e simples para a detecção do patógeno, principalmente em plantas assintomáticas, o objetivo deste estudo foi produzir um anticorpo policlonal específico para E. psidii e desenvolver um teste de aglutinação. Para a obtenção dos anticorpos um coelho macho da raça Nova Zelândia foi imunizado com 100 μg de antígeno emulsificado de um isolado de E. psidii. Este procedimento foi repetido aos 21 e 40 dias após a primeira imunização. Anticorpos policlonais purificados obtidos do coelho foram dialisados em tampão fosfato por 4 h em câmara fria a 4 ° C e sua concentração ajustada para 1 mg / mL, sendo armazenada a 4 ºC. Em seguida, culturas bacterianas de E. psidii e de outros dois patógenos bacterianos do eucalipto, X. axonopodis e R. solanacearum, armazenadas em glicerol a 30% (-80 °C) foram semeadas em meio sólido 523 e as placas foram incubadas durante 48 h a 28 ° C. Posteriormente, uma suspensão bacteriana foi preparada com uma colônia individual em 100 µL de água destilada estéril. Para realizar o teste, 10 μL da suspensão bacteriana e 10 μL do anticorpo foram colocados em uma lâmina de vidro e misturados manualmente por 5 min até a formação de pequenos ou maiores aglomerados. O anti-soro Anti-Ep reagiu positivamente apenas contra o isolado E. psidii testado e foi negativo para outros dois patógenos bacterianos do eucalipto, Ralstonia solanacearuam e Xanthomonas axonopodis. A próxima etapa será validar o teste sorológico contra uma ampla gama de isolados de E. psidii e de outras bactérias endofíticas do eucalipto. |
Palavras-chave |
Psidium guajava, anticorpos policlonais, dieback |
Forma de apresentação..... |
Oral |