Resumo |
Uma classe de moléculas com potencial para defesa são os peptídeos antimicrobianos (AMPs), que cumprem a função de primeira linha de defesa em organismos multicelulares, principalmente plantas e insetos. Tais compostos apresentam ação contra bactérias, fungos, vírus encapsulados e até contra células cancerosas. A Plantago major L. é uma planta medicinal que pertence à família Plantaginaceae e é conhecida popularmente como tanchagem. Estudos etnofarmacológicos mostram que essa planta contém diversos constituintes com efeitos terapêuticos e tem sido utilizada no tratamento de diversas doenças por séculos em quase todas as partes do mundo. Os principais benefícios da tanchagem está no seu efeito cicatrizante, combate a úlcera, diabetes, diarreia, seu chá é um bom anti-inflamatório, antibacteriano, antiviral e antioxidante, que ajuda no combate ao câncer. Portanto, esse trabalho se destinou à extração e caracterização de peptídeos de baixa massa molecular com atividade antimicrobiana, antifúngica e nematicida a partir de extratos aquosos obtidos de folhas frescas de tanchagem. Com as folhas coletadas, foram preparados dois extratos, um em tampão Tris-HCl 50 mM, contendo inibidores de proteases, e outro em ácido acético 10% (v/v). Os dois tipos de extratos obtidos foram submetidos ao mesmo tratamento: aquecimento seletivo a 80°C por 15 minutos, filtração em membrana Amicon de 10 kDa, concentração em cerca de 30 vezes e dessalinização em ZipTip C18. As amostras foram, então, submetidas à análise em espectrometria de massas (MS) do tipo MALDI-TOF/TOF, em equipamento Ultraflex III (Bruker Daltonics), no Núcleo de Análises de Biomoléculas da UFV, usando matriz ácido α-ciano-4-hidroxicinâmico em placa de aço MTP Anchor Chip TM 600/384 TF (Bruker Daltonics), sem redução e alquilação. Verificou-se que os espectros MS1 e MS2 apresentavam íons com caráter peptídico, contendo padrão isotópico e imônios característicos de aminoácidos, indicando origem proteica. Os resultados vêm sendo analisados com ferramentas de bioinformática. As amostras serão reduzidas e alquiladas para novas análises MS1 e MS2 em MALDI-TOF/TOF, e novas extrações e purificações serão realizadas visando obter frações de peptídeos purificados para estudos estruturais e funcionais para aplicação biotecnológica. (Apoio financeiro: FAPEMIG, CNPq, FINEP e CAPES. Apoio técnico: DBB/UFV, NuBioMol/UFV e BIOAGRO/UFV). |