Ciência para a Redução das Desigualdades
15 a 20 de outubro de 2018
Trabalho 10358
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Veterinária |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Thiago Augusto Teles de Souza |
| Orientador | ABELARDO SILVA JUNIOR |
| Outros membros | Luiz Fernando Lino de Souza, Murilo Leone Miranda Fajardo, Natalia Fialho Gonzaga, Wendel Mayer de Souza Rezende |
| Título | Isolamento e caracterização genotípica de Mycoplasma hyopneumoniae a partir de amostras de pulmão provenientes de animais naturalmente infectados |
| Resumo | A Pneumonia Enzoótica (PE) é umas das principais doenças respiratórias dos suínos. É uma doença de caráter crônico e altamente contagiosa, causada pela bactéria Mycoplasma hyopneumoniae. O diagnóstico é realizado por uma combinação de testes sorológicos, moleculares e de isolamento em culturas específicas. Estudos relatam a variabilidade genotípica entre cepas isoladas de animais clinicamente doentes. Objetivou-se com esse estudo avaliar a diversidade genotípica de isolados de Mycoplasma hyopneumoniae provenientes de amostras de pulmão com lesões macroscópicas sugestivas de Pneumonia Enzoótica. As amostras foram coletadas em abatedouro industrial e armazenadas em bags estéreis à 4 °C. Posteriormente, no laboratório, foram processadas e mantidas em meio Friis modificado a 37°C sem agitação, e para cada amostra realizou-se 2 diluições seriadas. Ao se observar a mudança de cor do meio de vermelho para o alaranjado/amarelo, suspeitava-se do crescimento da bactéria. Para confirmação, foi realizada extração por kit comercial e PCR de Mycoplasma hyopneumoniae. As amostras positivas no meio líquido seguiram para a semeadura em placas (meio sólido). Com a observação satisfatória de colônias com morfologia típica da bactéria em questão ao microscópio, e o resultado do PCR de colônia indicando a presença de material genético de Mycoplasma hyopneumoniae, os isolados seguiam para as demais passagens em meio de cultura alternando-se os meio sólido e líquido e selecionando as colônias que iriam ser inoculadas, objetivando a obtenção de culturas puras. Para a caracterização genotípica, esses isolados foram testados, pela técnica de PCR convencional, para os genes NRFD, mhp0272, mhp0487, mhp0107, mhp0660, mhp372, mhp199, mhp0443, Hsp70, P37, P42, mhp0418 e mhp0461. Das 273 amostras testadas para os genes em questão, 4 foram negativas para o gene mhp0418, 3 foram negativas para o gene P37 e 1 foi negativa para o gene NRFD, demonstrando diferenças na frequência de genes dos isolados. Análises de bioinformática foram realizadas usando o BioNumerics Program 6.6, um dendograma foi criado e as amostras foram distribuídas em 4 clusters, sugerindo a variabilidade genética entre os isolados. Considerando-se que os genes avaliados codificam para proteínas que são possíveis fatores de virulência da bactéria em questão, novos estudos se fazem necessários objetivando avaliar a expressão desses genes e sua relação com a patogenia da doença. |
| Palavras-chave | Mycoplasma hyopneumoniae, isolamento, suíno |
| Forma de apresentação..... | Painel |