Resumo |
Pimentas e pimentões (gênero Capsicum) são uma cultura de grande interesse econômico com uso variado na alimentação, medicina e indústria. A cultura de tecidos vegetais é uma técnica com grande aplicação na agricultura, porém, a maioria das variedades de Capsicum são recalcitrantes à regeneração in vitro, fazendo da sua manipulação biotecnológica um processo difícil ou ineficiente. Um protocolo bem-sucedido de regeneração de plantas requer a escolha apropriada do explante, idade, meios de cultivo apropriados, concentração ideal de hormônios, e outros fatores físicos como temperatura, umidade e pH. Neste projeto, foram feitos ensaios de organogênese indireta objetivando a indução e produção de calos em explantes de Capsicum com intuito de promover a regeneração in vitro com alta eficiência nessa espécie. Após esterilização, foram semeadas 90 sementes de C. annuum variedade Ikeda Casca Dura em frascos contendo meio basal Murashige-Skoog (MS) onde permaneceram por 15 dias. Após esse período, os cotilédones foram seccionados e transferidos para placa com meio MS contendo ácido naftalenacético (NAA) 0,4µM e benzilaminopurina (BAP) 5µM. As placas foram incubadas à 26°C com intensidade luminosa de 22 ±3µmol m^(-2) s^(-1) por 60 dias para observação da formação de calos nas extremidades. O mesmo procedimento foi feito, porém os explantes foram transferidos para placas contendo apenas NAA 0,4µM onde permaneceram por 48 horas e foram transferidos para placas contendo BAP 5µM. Todo o processo foi repetido como os segmentos de hipocótilo das plântulas. Posteriormente, o experimento foi reproduzido com as mesmas condições, para os dois tipos de corte, porém com um meio de cultivo especialmente desenvolvido para Capsicum (CAP). As amostras dos ensaios que enraizaram foram transferidas para tubos de ensaio com meio MS contendo BAP 5µM por 30 dias a fim de verificar indução de caule. Os resultados demonstraram que o uso dos hormônios em conjunto aumentou a taxa de regeneração em comparação com os hormônios usados separadamente, e segmentos de hipocótilos tiveram uma maior taxa de enraizamento quando comparado com cortes do cotilédone. Os explantes que foram inoculados em meio CAP tiveram uma taxa de enraizamento maior e mais rápida em comparação com o meio MS. Através desse trabalho, pôde-se concluir que no gênero Capsicum, a calogênese é favorecida pelo uso de hipocótilos, com adição de NAA e BAP ao meio de cultivo CAP. Os resultados obtidos a partir desse projeto, poderão servir para elaboração de protocolo para transformação genética e regeneração altamente eficiente em cultivares do gênero Capsicum. |