Ciência para a Redução das Desigualdades
15 a 20 de outubro de 2018
Trabalho 10028
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Graziela dos Santos Paulino |
| Orientador | ELIZABETH PACHECO BATISTA FONTES |
| Outros membros | Hanna Durso Neves Caetano, Otto Teixeira Fraga Netto, PEDRO AUGUSTO BRAGA DOS REIS |
| Título | AtATAF1 como possível integrante da via de morte celular mediada por proteínas NRP/DCDs |
| Resumo | Atualmente, a causa das maiores perdas na produção vegetal se deve aos estresses bióticos e abióticos em plantas. A elucidação das vias de sinalização de morte celular mediada por proteínas NACs tem uma grande importância para o desenvolvimento de plantas mais bem adaptadas. Recentemente, foi identificada uma via de sinalização inédita, mediada por proteínas ricas em asparagina (NRPs), que propaga sinais de morte celular em resposta a estresses no retículo endoplasmático (RE) e estresse osmótico. Em soja, os fatores transcricionais GmNAC81 e GmNAC30 participam da via de morte celular mediada por NRPs. Tem sido demonstrado que esta via de morte celular é conservada em outras espécies vegetais. Em Arabidopsis thaliana, já foram descritos os ortólogos para alguns componentes da via. Entretanto, ainda não foi determinado o fator de transcrição que exerceria a função do componente GmNAC030 em Arabidopsis. Estudos in silico implicam o gene AtATAF1 como possível ortólogo de GmNAC030. Assim sendo, o objetivo do trabalho foi identificar se AtATAF1 está envolvido na via de morte celular programada mediada por proteínas NRPs em Arabidopsis. Para isso, inicialmente foi feito a clonagem do gene AtATAF1 em vetores de expressão em plantas, bactérias e leveduras. A localização celular de AtATAF1 foi determinada por microscopia de confocal e sua atividade transcricional foi determinada em ensaios de transativação em leveduras. Por meio de expressão transiente em N. benthaminaa de uma versão de ATAF1 fusionada a GFP, foi confirmado que AtATAF1 é localizada no núcleo. Foi também demonstrado que ATAF1 exibe atividade de transativação em leveduras, uma vez que a versão fusionada de ATAF1 no domínio de ligação ao DNA de GAL4 foi capaz de ativar a expressão do gene repórter HIS3. Para identificar se AtATAF1 interage com componentes da via de NRPs, foi feito a análise de interação proteína–proteína através do sistema duplo–híbrido de leveduras, o que demonstrou que AtATAF1 interage com GmNAC81. Plantas de Arabidopsis thaliana foram transformadas com os vetores binários de expressão contendo o gene ATAF1 sob o controle do promotor 35S. Essas plantas transformadas serão utilizadas na avaliação das linhagens nocautes complementadas e linhagens Col-0 superexpressando o gene ATAF1. Estes experimentos estão em andamento e devem auxiliar no entendimento do papel desse gene na via de sinalização de morte celular mediada por NRP/DCDs. |
| Palavras-chave | atATAF1, NRPs, GmNAC30 |
| Forma de apresentação..... | Oral |