Resumo |
Mycoplasma hyopneumoniae (Mhyo) é o agente etiológico da Pneumonia Enzoótica Suína, caracterizada por tosse seca, crescimento lento, dispneia, anorexia, febre e letargia. A doença é altamente prevalente nas principais regiões produtoras de carne do país, resultando em um impacto econômico considerável na indústria suína. As bacterinas que atualmente estão disponíveis no mercado oferecem apenas proteção parcial contra Mhyo. Sendo assim, o desenvolvimento de tecnologias para a elaboração de vacinas mais eficientes faz-se necessário. Considerando este panorama, o objetivo deste trabalho foi avaliar a imunogenicidade de antígenos recombinantes contra Mhyo em modelo murino através de ensaios sorológicos. Genes responsáveis pela expressão de proteínas estruturais do Mhyo foram selecionados para a produção de quimeras recombinantes. Os genes foram clonados e expressos em Escherichia coli, produzindo 4 quimeras diferentes. A fração solúvel das proteínas foi purificada pela técnica Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography (IMAC). No experimento animal, 45 camundongos machos foram separados em 9 grupos diferentes. Cada animal foi vacinado três vezes com 50g de proteína quimérica, 100g de Saponina e 10% de Al(OH)3 em um intervalo de 15 dias. Os camundongos nos grupos G1, G2, G3 e G4 foram vacinados com quimeras 1, 2, 3 e 4, respectivamente. Os camundongos dos grupos G5 e G6 foram vacinados com a combinação de quimeras. O grupo G5 foi vacinado com a combinação das quimeras 1, 2, 3 e 4. O grupo G6 foi vacinado com a combinação das quimeras 1, 2 e 4. Os camundongos vacinados com a vacina comercial (G7) e com o extrato completo de Mhyo cepa J (G8) foram usados como controles positivos. Os camundongos inoculados com PBS (G9) funcionaram como controles negativos. As amostras sanguíneas foram coletadas nos dias 0, 15, 30 e 45. O perfil sorológico foi avaliado pelo teste Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). O extrato de Mhyo cepa J foi utilizado como antígeno imobilizado na placa de ELISA. O estudo mostrou uma resposta sorológica significativa (IgG) em todos os grupos vacinados, com exceção do grupo inoculado com a combinação das quimeras 1, 2 e 4 (G6). Os mais altos níveis de anticorpos foram observados aos 45 dias após a inoculação. Além disso, começamos a avaliar as respostas imunes mediadas por células desencadeadas pelos agentes vacinais. O objetivo futuro é examinar a resposta imunológica contra Mhyo no modelo suíno. |