Resumo |
Bacillus amyloliquefaciens é uma bactéria Gram-positiva conhecida por estimular o crescimento vegetal e por produzir metabólitos secundários que controlam o crescimento de fitopatógenos presentes nas plantas e no solo. Biofertilizantes e formulações de biocontrole a partir do endósporo de estirpes de Bacillus spp. é uma alternativa promissora ao uso de pesticidas químicos e para o aumento da produção sustentável de culturas de grande interesse econômico. Dessa forma, este trabalho teve o objetivo de avaliar o antagonismo in vitro da bactéria endofítica B. amyloliquefaciens, isolada de seringueiras da floresta amazônica brasileira, aos fungos fitopatogênicos Colletotrichum karstii, Colletotrichum laticiphilium, Colletotrichum lindemuthianum (raça 89) e Sclerotinia sclerotiorum. O antagonismo foi testado em ensaios de cultura pareada, onde a bactéria endofítica foi inoculada em um lado da placa de Petri de 90 mm contendo 20 mL de meio de cultura Batata Dextrose Ágar (BDA). Após 48 horas, o fungo fitopatogênico foi inoculado no lado oposto da placa. Isso foi realizado para os quatro diferentes fitopatógenos, com três repetições cada. As placas foram incubadas em BOD a 25 °C, fotoperíodo de 12 h e distribuídas ao acaso. Para o controle negativo, placas foram inoculadas com os fungos fitopatogênicos sem a presença da bactéria. A porcentagem da inibição do crescimento micelial dos fitopatogênicos (IC) foi calculada aplicando a fórmula IC= [(C-T)/C]x100, onde C é o crescimento micelial do controle e T é o crescimento micelial nos tratamentos. O crescimento micelial do fitopatógeno foi medido quando as colônias das placas do controle atingiram tamanhos superiores a 3 cm. Posteriormente, os valores foram submetidos a análise ANOVA e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey, ao nível de 5% de significância. Para a identificação dos genes que codificam lipopeptídeos produzidos pela bactéria, reações de PCR (Polymerase chain reaction) foram realizadas com primers correspondentes aos genes de biossíntese de bacilomicina A, fengicina, iturina A e surfactina. A bactéria B. amyloliquefaciens inibiu significativamente todos os quatro fungos fitopatogênicos testados. A inibição do crescimento dos fungos fitopatogênicos C. karstii e C. laticiphilium foi de 32,8% e 12,77%, respectivamente, já a inibição do crescimento de C. lindemuthianum foi de 48,15% e de S. sclerotiorum foi igual a 48,36%. Os resultados da PCR demonstraram que a bactéria endofítica possui genes para a biossíntese de bacilomicina A, iturina A e surfactina. Assim, a bactéria B. amyloliquefaciens é um potencial agente para controle de fitopatógenos. Os próximos passos da pesquisa serão a extração e identificação dos compostos antimicrobianos e a avaliação do controle dos patógenos em plantas de feijoeiro e seringueira. |