Resumo |
Embriões somáticos podem ser originados a partir de uma única célula ou a partir de um pequeno grupo de células que se diferenciam em uma estrutura organizada sob circunstâncias ainda mal caracterizadas. A utilização de diferentes meios de cultura e a sua composição, principalmente no nível de macronutrientes, apresenta importância para a eficiência dos processos de propagação vegetativa. Dessa maneira, objetivou-se avaliar a diferença de meios de cultura e concentração de macronutrientes, mais especificadamente de cálcio, na eficiência da indução de embriões somáticos em cotilédones de Eucalyptus urophylla x E. grandis. Os experimentos foram realizados no laboratório de Cultura de Tecidos II do Instituto de Biotecnologia Aplicada a Agropecuária -BIOAGRO, da Universidade Federal de Viçosa – UFV. As sementes foram esterilizadas e inoculadas em placas de petri estéreis e descartáveis (90 x 15 mm) contendo 30mL de meio JADS contendo 50% dos sais e vitaminas (exceto a solução de cálcio, que não foi adicionado), 50 mg.L-1 de mio-inositol, 1,5% de sacarose e 7 g.L-1 de ágar e pH ajustado para 5,8. As sementes foram mantidas em sala de cultura sob temperatura de 24±1 oC, fotoperiodo de 16h luz e 8h escuro, irradiância de 30 μmol m-2 s-1. Para a indução da embriogênese somática, foram utilizados como fontes de explantes, cotilédones retirados de plântulas com 10 dias, germinadas in vitro, do hibrido de Eucalyptus urophylla x E. grandis. Os explantes foram inoculados em placas de petri estéreis e descartáveis (60 x 15 mm) contendo 15mL de meio MS ou JADS contendo 100% dos sais (exceto a solução de cálcio) e vitaminas, 100 mg.L-1 de mio-inositol, 30% de sacarose e 7 g de ágar e pH ajustado para 5,8. Foram adicionadas ao meio de cultura as concentrações de 10,00; 15,00; 20,00 ml/L da solução de cálcio. Foi utilizado o delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x3 com seis repetições e 10 explantes/repetição. Após 30 dias foram avaliados o número de embriões somáticos, calogênese, calos friáveis e calos oxidados formados para cada tratamento. As variâncias foram comparadas pelo teste F e as medias pelo teste Tukey, ambos a 5% de probabilidade. Foram encontradas diferenças significativas (p<0.05) para o cálcio em todas as características avaliadas. Em relação aos meios utilizados, foram encontradas diferenças significativas (p<0.05) apenas para as características calogênese e ocorrência de calos friáveis, sendo o meio JADS mais eficiente. O mais indicado para a obtenção de embriões somáticos, de acordo com os tratamentos, seriam através de indução em meio JADS 10ml/L e/ou MS 15ml/L. A queda do número de embriões somáticos relacionados à concentração de 20ml/L nos dois meios, pode ser justificada pela possível intoxicação por excesso de cálcio nos limites fisiológicos dos explantes e do processo embriogênico, mostrando ser ineficiente essa concentração de cálcio tanto para o meio JADS, como para MS. |