Resumo |
Staphylococcus aureus é um patógeno humano oportunista responsável por doenças que vão desde intoxicações alimentares e infecções superficiais da pele a doenças mais graves como endocardite, pneumonia, meningite, sepses e síndrome do choque tóxico. Sua patogenicidade é resultante da combinação de fatores de virulência associados à produção de toxinas, invasividade, resistência a antibióticos e formação de biofilmes. Na indústria alimentar, S. aureus causa grande preocupação, principalmente em razão da capacidade de aderir e formar biofilmes altamente resistentes em superfícies de processamento de alimentos, representando uma fonte de alto risco de contaminação cruzada. Os peptídeos antimicrobianos, tais como as bacteriocinas, podem ser uma estratégia para prevenir a adesão celular. O objetivo desse trabalho foi compreender melhor a interferência de concentrações subinibitórias da bacteriocina nisina, produzida por Lactococcus lactis, na adesão de S. aureus à superfície de poliestireno pela análise da expressão de genes de adesão. Genes relacionados com fatores de virulência também serão avaliados. Inicialmente foram realizadas curvas de crescimento para selecionar a concentração sub-inibitória de nisina, ou seja, aquela que não era capaz de afetar a taxa de crescimento de S. aureus. A concentração de 0,32 mM de nisina foi estabelecida e, posteriormente, biofilmes de diferentes estirpes de S. aureus foram formados em placas de poliestireno utilizando meio de cultivo TSB acrescido de 1% de glicose na presença ou ausência de 0,32 mM de nisina. A concentração subinibitória de nisina foi capaz de reduzir a adesão das estirpes avaliadas, indicando a eficácia dessa bacteriociona no controle da formação de biofilme. Devido a melhor capacidade de formação de biofilme, a estirpe S. aureus 6538 foi selecionada para análises posteriores. Células sésseis e planctônicas de S. aureus 6538 serão submetidas à extração de RNA e os níveis relativos de RNAm de genes relacionados com a formação de biofilme e fatores de virulência serão analisados pela técnica de PCR em tempo real (RT-qPCR). Os resultados obtidos contribuirão para a compreensão da ação de nisina na inibição da adesão bacteriana e expressão de genes de virulência, utilizando-se de análise transcriptômica. Pretende-se revelar novos alvos potenciais para o controle de patógenos e, assim, propor novas alternativas para o controle da formação de biofilmes por S. aureus. |