Do Lógico ao Abstrato: A Ciência no Cotidiano
23 a 28 de outubro de 2017
Trabalho 8563
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Fitopatologia |
| Setor | Departamento de Fitopatologia |
| Bolsa | CAPES |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Camila Ribeiro Costa |
| Orientador | ACELINO COUTO ALFENAS |
| Outros membros | Claudia Nohemy Montoya Estrada, Gustavo Marin-Ramírez, Lúcio Mauro da Silva Guimarães |
| Título | Desenvolvimento e validação de primers específicos via PCR para detecção de Erwinia psidii em Eucalyptus spp |
| Resumo | Dos fitopatógenos bacterianos da eucaliptocultura, merece destaque a bactéria Erwinia psidii, que causa a seca de ponteiros e em alguns casos a murcha e morte da planta, gerando grandes prejuízos para a cultura. Por se tratar de um novo patossistema, sua disseminação é desconhecida e são poucas as medidas de manejo aplicadas para seu controle. Uma das hipóteses é que o patógeno pode estar sendo disseminado por mudas assintomáticas e quando há um ambiente favorável a doença manifesta-se. A fim de evitar o plantio de mudas com a bactéria, são necessários métodos rápidos e sensíveis para a detecção do patógeno, principalmente em amostras assintomáticas. Assim, o presente estudo objetivou desenvolver primers específicos para a detecção de E. psidii em eucalipto, testar sua especificidade e sensibilidade e validar no eucalipto os primers Ep2L/Ep2R, desenvolvidos para a detecção de E. psidii em goiabeira. A partir das sequências depositadas no GenBank dos genes gapA e rpoB de E. psidii, foram desenhados quatro primers no programa Primer-Blast. A especificidade dos primers foi testada com dez isolados de E. psidii obtidos de amostras de eucalipto, sete isolados de bactérias endofíticas também obtidas de eucalipto, um isolado de Ralstonia solanacearum (UFV 32) e um isolado de Xanthomonas axonopodis (UFV 587), bactérias fitopatogênicas do eucalipto. A sensibilidade dos primers foi testada com o DNA do isolado LPF534, diluído em série. Dos quatro primers desenhados, apenas o gapA 6F/6R apresentou especificidade para E. psidii, amplificando um fragmento de 400 pb. Os demais amplificaram fragmentos em algumas das bactérias endofíticas. Assim, como o gapA 6F/6R, o primer Ep 2L/2R desenvolvido para detecção da bactéria em goiabeira foi eficiente para a detecção de E. psidii em amostras de eucalipto. Comparando o poder de detecção dos dois primers, verificou-se que o gapA 6F/6R é quatro vezes mais sensível (0,7 ng/µL) que o Ep 2L/2R (2,7 ng/µL). Conclui-se que os primers gapA 6F/6R e Ep 2L/2R são eficientes para a detecção de E. psidii em Eucalyptus spp, sendo o par de primers gapA 6F/6R mais vantajoso por apresentar maior poder de detecção. |
| Palavras-chave | Eucalyptus spp, Erwinia psidii, PCR |
| Forma de apresentação..... | Oral |