Do Lógico ao Abstrato: A Ciência no Cotidiano

23 a 28 de outubro de 2017

Trabalho 8507

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Bioquímica
Setor Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Bolsa FAPEMIG
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro FAPEMIG
Primeiro autor Célio Cabral Oliveira
Orientador ELIZABETH PACHECO BATISTA FONTES
Outros membros Larissa Pereira Miguel, Luiz Fernando de Camargos, PEDRO AUGUSTO BRAGA DOS REIS
Título Caracterização das proteínas reguladoras PLDα1 e RGS1 na modulação da via de morte celular mediada por NRP/DCD
Resumo A sobrevivência de organismos vegetais está sujeita a adaptações desencadeadas por diversas condições ambientais e, para que isto ocorra, mecanismos de regulação da expressão gênica são constantemente ativados por meio de vias de sinalização celular. Assim, o estudo de tais adaptações é essencial para a obtenção de plantas que sejam geneticamente aptas a tolerar estresses que representam detrimento à agricultura mundial. Dentre os possíveis estresses sofridos por plantas, estão os estresses osmóticos e no retículo endoplasmático, cujas respostas são moduladas pelo chaperone molecular BiP (binding immunoglobulin protein). Em convergência a estas duas respostas adaptativas, destaca-se o papel dos genes NRPs (codificantes de proteínas ricas em asparagina), responsáveis por atuar no processo de morte celular programada. A via de sinalização mediada por NRPs e seus respectivos domínios de morte celular (DCD) é conservada entre espécies e pode ser modulada negativamente pelo chaperone BiP, enquanto que subunidades da proteína trimérica G possivelmente constituem reguladores positivos da respectiva via de sinalização.. Reguladores de sinalização de proteína G (RGS) são conhecidos por acelerar a atividade GTPase exercida pela subunidade Gα da proteína heterotrimérica, presente também na membrana do RE e possivelmente responsável pelo trânsito de informações do RE para núcleo na via NRP/DCD. Tem sido demonstrado, em Arabidopsis thaliana, que a fosfolipase Dα1 (PLDα1), assim como RGS1, tem papel fundamental na regulação da atividade GTPase e interage com Gα e Gβ, um possível componente upstream à NRP na via de resposta a estresses, formando um complexo protéico responsável pela especificidade de sinal e plasticidade das interações nas células vegetais. Sabe-se também que, similarmente a superexpressão de BiP, a superexpressão de RGS1 resulta em plantas tolerantes ao estresse hídrico. Desta forma, o trabalho visa compreender, em Arabidopsis thaliana, mecanismos de resposta a diferentes tipos de estresses abióticos envolvendo as subunidades de proteínas G heterotriméricas e seus moduladores, as proteínas RGS1 e PLDα1. Utilizando o sistema de clonagem Gateway, RGS1 foi clonada em vetor binário para expressão em plantas, pK7FWG2, possibilitando a realização do ensaio de expressão transiente da proteína fusionada à GFP em Nicotiana benthamiana. A localização subcelular foi determinada através de microscopia confocal, confirmando ser uma proteína de membrana. A clonagem também foi realizada em vetores de expressão em levedura pDEST22 e pDEST32 para utilização em futuros ensaios de duplo-híbrido.
Palavras-chave arabidopsis, bip, rgs1
Forma de apresentação..... Oral, Painel
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