Do Lógico ao Abstrato: A Ciência no Cotidiano
23 a 28 de outubro de 2017
Trabalho 8427
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Bioquímica |
| Setor | Departamento de Biologia Geral |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Amanda Patrícia Gonçalves |
| Orientador | ANESIA APARECIDA DOS SANTOS |
| Título | Estudo da modulação da via de sinalização de defesa de plantas mediada pela proteína NIK1 (NSP INTERACTING KINASE) e por outros receptores cinase em plantas |
| Resumo | A percepção de sinais através de receptores da superfície celular é um mecanismo comum entre os organismos vivos. Proteínas cinases possuem um papel fundamental em uma grande variedade de processos celulares. A família de genes que codifica receptores do tipo cinases (Receptors Like Kinase - RLKs), constitui uma das maiores no genoma de plantas, e estão envolvidos em todos os aspectos da biologia da planta, desde os eventos que ocorrem na embriogênese até a resistência a doenças. Esses receptores transmembrana exibem uma estrutura conservada caracterizada por uma porção amino-terminal extra citoplasmática, uma porção transmembrana seguida por um sítio de ligação a nucleotídeo (NBS) e um domínio citoplasmático carboxi-terminal que apresenta atividade de serina/treonina cinase. NIK1 (NSP-interacting kinase-1) é um receptor transmembrana do tipo serina/treonina cinase de Arabidopsis thaliana que está inserido no grupo formado por proteínas de defesa. As proteínas NIKs foram identificadas por sua capacidade de interagir com a proteína NSP (nuclear shuttle protein) de geminivírus, a qual atua inibindo as atividades de autofosforilação e de fosforilação de substratos exógenos de NIK e, portanto, acredita-se que interfere nas vias de defesa a patógenos mediados por esse receptor. O interesse majoritário dessa linha de pesquisa consiste em elucidar os mecanismos bioquímicos associados às respostas a estresses com o objetivo eventual de desenvolver estratégias moleculares para aquisição de resistência. Experimentos anteriores demonstraram que os resíduos de Thr474 e Thr469 apresentam efeitos antagônicos no mecanismo de ação do receptor NIK1. Dessa forma, este trabalho objetivou a avaliação do efeito destes resíduos aminoacídicos in vivo através da construção de um duplo mutante (AtNIK1T469A/T474D) e inserção do mesmo em vetor para expressão ectópica contendo cauda de GFP (green fluorescente protein). Através da metodologia de extração de DNA e recombinação homóloga foram obtidos os clones utilizados na construção do duplo mutante da proteína NIK1. Posteriormente, esta construção foi transferida para Agrobacterium tumefaciens e finalmente utilizada na transformação de plantas nocautes para o gene NIK1 através do protocolo de imersão floral. Sementes obtidas das plantas submetidas ao procedimento de transformação foram selecionadas em antibiótico e avaliadas quanto a expressão do transgene. Os resultados demonstraram que foram obtidos transformantes independentes contendo a construção de interesse com expressão estável. Tal construção poderá ser utilizada como uma ferramenta molecular para o estudo da aquisição de resistência em plantas de interesse. |
| Palavras-chave | NIK1, geminivírus, resistência a patógenos |
| Forma de apresentação..... | Painel |