ISSN |
2237-9045 |
Instituição |
Universidade Federal de Viçosa |
Nível |
Graduação |
Modalidade |
Pesquisa |
Área de conhecimento |
Ciências Biológicas e da Saúde |
Área temática |
Bioquímica |
Setor |
Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
Bolsa |
FAPEMIG |
Conclusão de bolsa |
Sim |
Apoio financeiro |
CAPES, CNPq, FAPEMIG |
Primeiro autor |
Luciana de Souza Fernandes |
Orientador |
GUSTAVO COSTA BRESSAN |
Outros membros |
Fernanda Gonçalves Barbosa, Geniana da Silva Gomes, Maria Roméria da Silva, Thiago Souza Onofre |
Título |
Obtenção de swiprosin-1 recombinante para estudos de interação com as Serine Arginine Protein Kinases (SRPKs) |
Resumo |
A capacidade migratória de células tumorais está entre as principais causas relacionadas a mortalidade em câncer. A metástase é um processo complexo que envolve aumento da proliferação celular dentro de tecido, migração para tecidos adjacentes e disseminação para órgãos distantes. O aumento da motilidade é assegurado pela formação de protrusões de membrana como lamelipódios, filopódios e microvilos, que são estruturas compostas por filamentos de actina e proteínas associadas. Swiprosin-1 é uma proteína envolvida na regulação do acesso de cofilina aos filamentos de F-actina. Ela possui em estrutura dois domínios EF-hand de ligação ao cálcio responsáveis por sua funcionalidade e um domínio coiled-coil envolvido em sua dimerização. Significativos estudos têm apontado o envolvimento desta proteína em câncer. Em melanomas, ela encontra-se superexpressa e sua ação responde a estímulos externos recebidos pela célula, como a ligação do fator de crescimento EGF. As Serine Arginine Protein Kinases (SRPKs) também têm suas atividades reguladas por este tipo de estímulo. Estas proteínas participam da regulação dos eventos de splicing em células eucarióticas reconhecendo e fosforilando domínios RS de proteínas SR. EGF regula a localização subcelular de SRPKs e, deste modo, regula sua funcionalidade. Estudos de duplo híbrido realizados por nosso laboratório de pesquisa identificaram uma interação entre a região espaçadora de SRPK2 e SWS1. Neste sentido, a investigação de tal interação foi o objeto de estudo neste trabalho. SWS1 foi obtida por meio de sua clonagem, expressão e purificação da proteína recombinante. A proteína foi utilizada na produção de anticorpos anti-SWS1 em coelho, os quais permitiram a realização de ensaios funcionais como imunoprecipitação. Observou-se que SWS1 interage com SRPK2 tanto em células normais quanto tumorais. Ensaios de fosforilação foram conduzidos para averiguar se SWS1 atua como substrato para SRPK2, porém os resultados revelaram que tal evento, naquelas condições de ensaio, não ocorre. O entendimento da relação entre SWS1 e SRPK2 traz a perspectiva do descobrimento de funções alternativas de SRPK2 na célula que por hora não são conhecidas e ainda é de grande valia para o desenvolvimento de novas estratégias antitumorais. |
Palavras-chave |
Câncer, Metastases, SRPKs |
Forma de apresentação..... |
Oral, Painel |