Do Lógico ao Abstrato: A Ciência no Cotidiano
23 a 28 de outubro de 2017
Trabalho 8330
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Fitopatologia |
| Setor | Departamento de Fitopatologia |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Ana Carolina Silva Paiva |
| Orientador | CLAUDINE MARCIA CARVALHO |
| Outros membros | Ana Carolina Guerardi Goncalves, Silvia Leão de Carvalho |
| Título | Avaliação da propriedade de ligação a ácidos nucléicos da proteína p15 rica em cisteína (CRP) do Cowpea mild mottle virus (CPMMV). |
| Resumo | Uma das doenças em soja causadas por vírus que tem se destacado e disseminado rapidamente no Brasil é a necrose da haste de soja. O agente etiológico é o Cowpea mild mottle virus (CPMMV), gênero Carlavirus, família Betaflexiviridae, seu genoma é composto por RNA fita simples, sentido positivo, contendo seis fases abertas de leitura (ORFs): a ORF1 que codifica a replicase viral dependente de RNA; as ORF2-4 constituem o Bloco Triplo de Genes (TGB) que codificam proteínas responsáveis pelo movimento viral; a ORF5 codifica a proteína do capsídeo; e a ORF6 que codifica uma proteína rica em cisteína (CRP). O CPMMV leva à ocorrência de sintomas em soja como necrose da haste, necrose dos pecíolos e brotos, mosaico, mosqueado, redução do porte e até morte de plantas. O vírus é transmitido pela mosca-branca Bemisia tabaci MEAM1 de forma mecânica e não persistente. Apesar de diferentes isolados já serem caracterizados, os mecanismos relacionados à patogenicidade viral e as vias de resposta de defesa da planta, assim como as interações entre fatores do vírus e do hospedeiro, ainda são pouco compreendidos. O objetivo deste estudo foi avaliar a propriedade de ligação da proteína rica em cisteína p15 do CPMMV à região promotora do gene SNC1. Este gene está relacionado à imunidade desencadeada por efetores da planta hospedeira. Foi realizado o ensaio de mono-híbrido, em levedura Saccharomyces cerevisiae Y187, utilizando as construções recombinantes pGADT7AD-p15 e pLacZi-promSNC1. O cDNA da proteína “prey” foi clonado fusionado ao domínio de ativação (AD) transcricional localizado na porção C-terminal do gene Gal4 do vetor pGADT7AD. A região promotora do gene SNC1 “bait” foi clonada no vetor pLacZi que possui o gene repórter LacZ regulando a expressão e atividade da β-galactosidase. Desta forma, somente se houver interação proteína-DNA haverá atividade da β-galactosidase a qual atua como uma hidrolase sobre o x-gal, liberando um cromóforo azul. Os clones resultantes da transformação apresentaram coloração azul indicando que a proteína p15 está se ligando a região promotora do gene SNC1. |
| Palavras-chave | Soja, Cowpea mild mottle virus, mono-híbrido |
| Forma de apresentação..... | Painel |