Resumo |
A micromanipulação de moléculas e células é cada vez mais importante para o amplo campo de pesquisa biofísica, fornecendo descrições qualitativas e quantitativas sobre a mesma. Ao observar a espectroscopia de força de molécula única, podemos descrever a mecânica, a variação de estrutura e as interações, obtendo uma imagem mais completa do sistema. Uma das técnicas de alta resolução para medidas de moléculas única é a pinça magnética, existindo também a pinça óptica. Pinças magnéticas são instrumentos que utilizam um campo magnético externo para aplicar força em uma microesfera magnética ligada a uma ponta da molécula de DNA, enquanto a outra ponta está ligada a uma lamínula de microscópio. Este campo pode ser gerado por diferentes configurações de imãs permanentes ou por fios transportando correntes, desde que sejam posicionados de forma correta, otimizando o campo magnético, que deve seguir as seguintes propriedades: a força que ele gera na microesfera magnética deve ser preferencialmente vertical e apontando para cima (embora outras configurações sejam possíveis para medidas específicas); a intensidade da força pode ser alterada movendo-se o imã; além disso o campo deve impedir que a esfera gire livremente em torno do eixo vertical e deve poder ser usado para impor rotação em determinados ângulos. Com esse aparato conseguimos obter a curva de força por extensão, determinando propriedades mecânicas do complexo de DNA-fármaco. Existem vários desafios que ainda precisam ser resolvidos na montagem iniciada em nosso laboratório, como o melhoramento da precisão de rastreamento espacial, a medição direta do torque aplicado a molécula de DNA e o desenvolvimento de instrumentação e software para uma melhor análise de dados. Ainda existe uma grande diversidade de biomoléculas e interações a serem caracterizadas in vitro no nível de molécula única. Com o melhoramento da técnica de pinça magnética e com a utilização de outras técnicas como Microscopia de força atômica (AFM) e Fluorescência, poderemos medir e aprimorar nossa compreensão da estrutura molecular e da dinâmica destas biomoléculas e suas interações. |