Do Lógico ao Abstrato: A Ciência no Cotidiano

23 a 28 de outubro de 2017

Trabalho 7761

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Agrárias
Área temática Fitopatologia
Setor Departamento de Fitopatologia
Bolsa CNPq
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros
Primeiro autor Pedro Ricardo Rossi Marques Barreiros
Orientador LAERCIO ZAMBOLIM
Outros membros Eveline Teixeira Caixeta, Hélvio Gledson Maciel Ferraz, TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES
Título Caracterização de raças e patótipos de Hemileia vastatrix utilizando marcadores REMAP
Resumo Dentre as doenças que acometem a cultura do cafeeiro, a ferrugem alaranjada, causada pelo fungo Hemileia vastatrix Berk. & Broome, é a principal doença que em condições favoráveis e na ausência de controle químico, pode causar perdas na ordem de 35 a 50% da produção, especialmente em Coffea arabica. H. vastatrix apresenta alta variabilidade genética, no Brasil, já foram relatadas 15 raças fisiológicas do fungo (I, II, III, VII, X, XIII, XV, XVI, XVII, XXII, XXIII, XXIV, XXV ou XXXI, XXXIII, XXXVII), sendo a raça II a predominante. Tradicionalmente, a variabilidade genética em H. vastatrix tem sido determinada pelo padrão de infecção observado em uma série de diferenciadores de cafeeiros. Entretanto, vários patótipos do fungo não podem ser caracterizados pela série diferenciadora, pois estas variantes possuem grande espectro de virulência, ou seja, tais patótipos possuem combinação complexa de genes de virulência não podendo ser caracterizados em raças fisiológicas pela atual série diferenciadora de cafeeiros. Diante do exposto, o presente trabalho testou dezesseis combinações de primers REMAP, do inglês retrotransposon-microsatellite amplified polymorphism, para diferenciar as raças e patótipos de H. vastatrix. Os primers REMAP são compostos por um primer desenhado a partir da região LTR de um retrotransposon e um primer ISSR. Inicialmente, foram testadas 16 combinações de primers REMAP, sendo selecionadas 4 combinações, por produzirem maior quantidade e mais nítido padrão de banda em gel de agarose a 2%. As reações de amplificação utilizando primers REMAP, foram feitas em tubos de eppendorf para um volume final de 20 µL contendo, tampão da Taq polimerase 1X (10 mmol de Tris HCL L-1 e 50 mmol de KCL L-1), 2,5 mmol de MgCl2 L-1, 0,6 unidades de Taq polimerase, 200 µmol de cada dNTP L-1, 0,3 µmol do primer LTR L-1, 0,2 µmol do primer ISSR L-1 e 50 ng do DNA alvo. As condições de amplificação foram: 94 °C por 10 min, seguido por 40 ciclos de 94 °C por 45 s, 50 °C por 45 s e 72 °C for 1 min; e por fim, 72 °C por 10 min para extensão final. Os padrões de bandas obtidos, para as diferentes raças e patótipos da coleção de H. vastatrix do Laboratório de Biotecnologia do Cafeeiro (BIOCAFÉ) da Universidade Federal de Viçosa, poderão auxiliar na identificação das raças e patótipos, o que é de suma importância para nortear as medidas de controle e auxílio aos programas de melhoramento do cafeeiro.
Palavras-chave Hemileia vastatrix, Marcadores Moleculares, Coffea spp.
Forma de apresentação..... Painel
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