Conexão de Saberes e Mundialização

19 a 24 de outubro de 2015

Trabalho 5211

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Alimentos, nutrição e saúde humana
Setor Departamento de Medicina e Enfermagem
Bolsa PIBIC/CNPq
Conclusão de bolsa Sim
Apoio financeiro CNPq
Primeiro autor Ricardo Felipe dos Santos
Orientador SILVIA ALMEIDA CARDOSO
Outros membros Alessandra Teixeira de Paula, Filipe Oliveira Furtado, Gabriel Conde Motta, Kimberly Freitas Cardoso
Título Construção de uma vacina de DNA codificando o antígeno NTPDase-1, contra Trypanosoma cruzi.
Resumo A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é responsável por significativa mortalidade e morbidade no Brasil e em toda América latina, e uma potencial ameaça emergente para uma série de países em todo o mundo. Segundo a organização mundial de saúde ,OMS,estima-se que mais de 10(dez) milhões de pessoas estejam atualmente infectadas com Trypanosoma cruzi, um terço das quais irá desenvolver cardiomiopatia potencialmente fatal e/ou desordens do aparelho digestivo grave. Atualmente os medicamentos utilizados na clínica desta doença, apresentam inúmeros efeitos colaterais e baixa eficácia. Embora diversas pesquisas demonstrem a redução de parasitemia ou controle dos sintomas, com vacinas de subunidades, ainda não existe um método preventivo totalmente eficaz para a doença de Chagas. O nosso grupo de pesquisa vem trabalhando na avaliação dos efeitos da enzima NTPDase-1 na doença de Chagas experimental. Esta enzima foi previamente descrita como um importante fator de virulência de Trypanosoma cruzi. Assim o objetivo central do presente estudo é a construção de uma vacina de DNA, codificando o antígeno NTPDase-1 de T. cruzi (TcNTPDase-1). O gene codificante de TcNTPDase-1 foi enzimaticamente retirado do plasmídeo pET21B (gentilmente cedido pela professora Juliana Fietto) e posteriormente inserido, com auxílio da enzima T4 ligase no plasmídeo de expressão pVAX, previamente linearizado. O DNA plasmidial contendo o inserto em questão, foi caracterizado e posteriormente utilizado em ensaio de transformação em bactérias competentes da linguagem E. coli, DH5α. A construção foi caracterizada, por ensaio da polimerase em cadeia (PCR) com iniciadores específicos. Todas as colônias testadas apresentaram em eletroforese de agarose, uma banda de aproximadamente 900 pb, como esperado para o inserto de TcNTPDase-1. Desta forma podemos concluir que a construção da linhagem bacteriana recombinante, com inserto para o antígeno NTPDase-1 de T. cruzi, foi realizada com sucesso.
Palavras-chave DNA, doença de chagas, vacina
Forma de apresentação..... Painel
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