Resumo |
Recentemente, foi identificada uma via de sinalização inédita, mediada por proteínas ricas em asparagina (NRPs), que transduz sinais de morte celular originados por estresses no retículo endoplasmático (RE) e estresse osmótico. Esta via de resposta a estresses foi designada via integrativa por integrar sinais de estresses no RE e osmótico em uma resposta adaptativa comum e potencializada. Na região promotora de NRP-B existe uma sequencia que permite a ligação da proteina GmERD15, a qual é capaz de ativar a transcrição de NRP-B. Este gene quando superexpresso é capaz de ativar a expressão de GmNAC6 e este efetivar o processo de morte celular. Esta via de sinalização esta sob o controle do chaperone molecular BiP, o qual promove o atraso na expressão dos genes da via mediada por NRP em condições de estresse osmotico e do RE, além de alterar a atividade de morte celular de componentes da via de sinalizacao. O gene BiP (“Binding Protein”) confere tolerância à seca por um mecanismo que consiste na modulação da via de sinalização de morte celular mediada por NRP (N-rich protein), ou seja, BiP retarda a senescência induzida por seca e com isso mantem a homeostase celular em condições de desidratação. Uma vantagem considerável desse mecanismo de tolerância à seca, em relação aos mecanismos tradicionais de reprogramação gênica induzida por fatores de transcrição (do tipo DREB), seria que as linhagens transgênicas em condições normais de crescimento são fenotipicamente idênticas às linhagens não transformadas apresentando um desempenho igual ou superior a estas linhagens parentais não transformadas. Este conjunto de informações foram derivadas de estudos de tolerância à seca em linhagens transgênicas de soja, cv Conquista, superexpressando o gene BiP, sob o controle do promotor 35S do vírus do mosaico dourado da couve flor e designadas 35S::BiP-C9 e 35S::BiP-A8. O objetivo principal dessa investigação foi introgredir o transgene BiP nas variedades elites TM67262, tolerante à Ferrugem Asiática, e UFVTN105AT, com alto teor de proteína. Para isso, inicialmente a incorporação do transgene BiP em homozigose foi monitorada nas linhagens transgênicas parentais por meio de PCR utilizando primers específicos, capazes de discriminar entre o gene BiP endógeno da soja e o transgene BiP. As linhagens 35S::BiP-C9 e 35S::BiP-A8 foram utilizadas para cruzamento genético com as variedades elites TM67262 e UFVTN105AT e a seleção de progênies foi feita por PCR. Um total de 9 sementes F1 de cada cruzamento foram confirmadas para prosseguir aos retrocruzamentos, cuja geração atual encontra-se no RC2. Análise de segregação na geração F2 estão sendo conduzidas para avaliar a interação de genótipos com o caráter de tolerância mediada por BiP. |