Conexão de Saberes e Mundialização
19 a 24 de outubro de 2015
Trabalho 4620
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Biotecnologia |
| Setor | Departamento de Veterinária |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Julio Crepaldi |
| Orientador | ABELARDO SILVA JUNIOR |
| Outros membros | Livia Mendes Pereira Fernandes, Otávio Valério de Carvalho |
| Título | Construção de plasmídeos com sistema de expressão de RNA de interferência para silenciamento gênico do vírus da cinomose canina |
| Resumo | Devido às características da doença e também à grande importância para a saúde animal e o impacto econômico de sua infecção na população canina, o vírus da cinomose canina (CDV) é um alvo potencial para estudos sobre terapia antiviral. Adicionalmente, apesar de existir vacinas comerciais, a cinomose persiste como uma das doenças canina de maior incidência e mortalidade tendo seu índice de letalidade inferior somente à raiva. A inexistência de um tratamento antiviral, específico e eficaz, associada à alta incidência e caráter de gravidade da doença intensifica a demanda por recursos terapêuticos no controle dos animais infectados. Buscando novas estratégias para cercear a replicação viral do CDV, o silenciamento gênico por RNA de interferência vem mostrando resultados promissores contra replicação de diferentes vírus de importância veterinária. O presente trabalho objetivou avaliar a inibição replicativa do CDV in vitro através do tratamento com três construções plasmidiais contendo sequências codificadoras para shRNAs (short hairpin RNAs) com regiões complementares para a grande proteína (L). Quatro concentrações foram avaliadas em triplicata para cada sequência. A quantificação de cópias do RNA do gene L foi realizada por RT-qPCR e todas as sequências resultaram em eficácia inibitória. O tratamento pENTR/U6-Li1 apresentou a maior diminuição da expressão da proteína L, com redução máxima de 61,09%, enquanto o tratamento pENTR/U6-Li2 demonstrou 56,86% de inibição da expressão da proteína L. Por outro lado, o tratamento pENTR/U6-Li3 apresentou menos que 50% de inibição para todas concentrações. O impacto dos tratamentos na infectividade viral foi evidenciado pela redução do título viral. A diminuição do título viral dose-dependente foi visualizada para todas as sequências, onde os tratamentos pENTR/U6-Li1 e pENTR/U6-Li3 resultaram em redução superior a 82%, e o tratamento pENTR/U6-Li2 apresentou redução em torno de 70%. Os resultados desse trabalho comprovam a eficácia do silenciamento gênico por RNAi para o CDV e representam uma ferramenta promissora no combate à cinomose canina. |
| Palavras-chave | terapia gênica, vírus, in vitro |
| Forma de apresentação..... | Painel |