Conexão de Saberes e Mundialização

19 a 24 de outubro de 2015

Trabalho 4618

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Biotecnologia
Setor Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Bolsa Outros
Conclusão de bolsa Sim
Primeiro autor Tales da Silva Mendes
Orientador LUCIANO GOMES FIETTO
Outros membros Gilza Barcelos de Souza
Título Obtenção e transformação de protoplastos de soja para estudos funcionais
Resumo Por serem organismos sésseis e de desenvolvimento contínuo, as plantas devem constantemente regular e modular sua expressão gênica para seu bom desenvolvimento e homeostase durante todo seu período de vida. A regulação da expressão gênica é realizada por proteínas de ligação ao DNA chamadas fatores de transcrição, responsáveis pela regulação de genes envolvidos em diversos processos essenciais para o desenvolvimento da planta. Uma das mais diversificadas famílias de fatores de transcrição corresponde à família bZIP, fatores de transcrição com um domínio zíper básico de leucinas, região específica de ligação ao DNA. O estudo de tais fatores de transcrição é importante para melhor compreender os mecanismos de regulação apresentados pelas plantas quando submetidos ao estresse. O uso de protoplastos tem se mostrado um versátil sistema experimental celular “in planta" para estudos funcionais de genes de interesse. A técnica de expressão transiente vem sendo bastante utilizada por possuir a vantagem de avaliar a expressão gênica em um curto período de tempo, e ainda não depender da regeneração de células transformadas para avaliar a transferência e função do produto gênico. O objetivo desse estudo foi padronizar a obtenção de protoplastos de soja (Glicyne max) e determinar a localização subcelular de proteínas bZIP. Foram realizadas análises por microscopia de fluorescência para determinar a localização subcelular de fatores de transcrição bZIPs em protoplastos de soja. Para isto os protoplastos foram transformados com vetores contendo sequências específicas codificadoras dessas proteínas fusionadas a sequências do gene de uma proteína repórter fluorescente, YFP (Yellow Fluorescent Protein). A obtenção de protoplastos foi padronizada. Um maior número de células com características físicas ótimas foi obtido. A localização subcelular das proteínas bZIP não foi possível ser determinada devido a baixa eficiência de transformação. Assim estamos alterando o protocolo com a intenção de aumentarmos a eficiência de transformação dos protoplastos.
Palavras-chave protoplastos, fatores de transcrição, bZIP
Forma de apresentação..... Painel
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