ISSN |
2237-9045 |
Instituição |
Universidade Federal de Viçosa |
Nível |
Graduação |
Modalidade |
Pesquisa |
Área de conhecimento |
Ciências Biológicas e da Saúde |
Área temática |
Biotecnologia |
Setor |
Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
Bolsa |
Outros |
Conclusão de bolsa |
Sim |
Primeiro autor |
Tales da Silva Mendes |
Orientador |
LUCIANO GOMES FIETTO |
Outros membros |
Gilza Barcelos de Souza |
Título |
Obtenção e transformação de protoplastos de soja para estudos funcionais |
Resumo |
Por serem organismos sésseis e de desenvolvimento contínuo, as plantas devem constantemente regular e modular sua expressão gênica para seu bom desenvolvimento e homeostase durante todo seu período de vida. A regulação da expressão gênica é realizada por proteínas de ligação ao DNA chamadas fatores de transcrição, responsáveis pela regulação de genes envolvidos em diversos processos essenciais para o desenvolvimento da planta. Uma das mais diversificadas famílias de fatores de transcrição corresponde à família bZIP, fatores de transcrição com um domínio zíper básico de leucinas, região específica de ligação ao DNA. O estudo de tais fatores de transcrição é importante para melhor compreender os mecanismos de regulação apresentados pelas plantas quando submetidos ao estresse. O uso de protoplastos tem se mostrado um versátil sistema experimental celular “in planta" para estudos funcionais de genes de interesse. A técnica de expressão transiente vem sendo bastante utilizada por possuir a vantagem de avaliar a expressão gênica em um curto período de tempo, e ainda não depender da regeneração de células transformadas para avaliar a transferência e função do produto gênico. O objetivo desse estudo foi padronizar a obtenção de protoplastos de soja (Glicyne max) e determinar a localização subcelular de proteínas bZIP. Foram realizadas análises por microscopia de fluorescência para determinar a localização subcelular de fatores de transcrição bZIPs em protoplastos de soja. Para isto os protoplastos foram transformados com vetores contendo sequências específicas codificadoras dessas proteínas fusionadas a sequências do gene de uma proteína repórter fluorescente, YFP (Yellow Fluorescent Protein). A obtenção de protoplastos foi padronizada. Um maior número de células com características físicas ótimas foi obtido. A localização subcelular das proteínas bZIP não foi possível ser determinada devido a baixa eficiência de transformação. Assim estamos alterando o protocolo com a intenção de aumentarmos a eficiência de transformação dos protoplastos. |
Palavras-chave |
protoplastos, fatores de transcrição, bZIP |
Forma de apresentação..... |
Painel |