Conexão de Saberes e Mundialização
19 a 24 de outubro de 2015
Trabalho 4611
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Biotecnologia |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | Outros |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros |
| Primeiro autor | Renato Lima Senra |
| Orientador | MARIA CRISTINA BARACAT PEREIRA |
| Outros membros | JOSE DOMINGOS GUIMARAES, Lorena Keller de Jesus Pereira, Marcos Jorge de Magalhães Júnior |
| Título | Análise proteômica do plasma seminal de garanhões mangalarga marchador em período de monta |
| Resumo | Os equinos são animais poliestrais sazonais, sendo que a atividade reprodutiva é primariamente regulada pelo foto-período. O reflexo dessa sazonalidade sobre os gametas masculinos é demonstrado nas diferenças estruturais e integridade funcional da membrana plasmática dos espermatozoides. As diferenças circanuais afetam a composição e o conteúdo hormonal do plasma seminal, e alguns fatores presentes no plasma seminal interagem com a superfície dos espermatozoides, modificando as características de sua membrana, e um desses componentes são as proteínas. As proteínas do plasma seminal têm sido apresentadas como responsáveis por algumas etapas do processo de fertilização, como o estabelecimento das reservas espermáticas no oviduto, a modulação da capacitação e a interação entre gametas. A proteômica do plasma seminal dos garanhões usando eletroforese bidimensional (2-DE) pode auxiliar no entendimento de fatores bioquímicos envolvidos na fertilidade e qualidade do sêmen. O objetivo desse trabalho foi avaliar o proteoma total do sêmen de garanhões em idade reprodutiva, em época de monta (outubro a abril), visando avaliar o perfil proteico para caracterização da fertilidade. Após avaliações físicas do sêmen e retirada das amostras para exames complementares, os espermatozoides foram separados do plasma seminal por centrifugação, e as amostras de plasma submetidas à separação por 2-DE. A focalização isoelétrica foi em sistema EttanIPGphor 3, em fitas de 24 cm e gradiente de pH entre 3 e 10. A segunda dimensão foi em SDS-PAGE em gel 14,5% T, e os géis corados com coomassie blue. Os géis foram digitalizados e analisados utilizando o programa Image Master 2D Platinum 7.0 (GE Healthcare, USA). Os spots de todas as proteínas expressas foram manualmente localizados, excisados, as proteínas reduzidas, alquiladas e tripsinizadas. As amostras foram então analisadas em espectrômetro de massas MALDI-TOF/TOF (Ultraflex III - Bruker Daltonics), por MS e MS/MS. Como resultado, encontrou-se um conjunto de proteínas específicas expressas nessa época de reprodução, podendo ser citadas: HSP-1 (12 spots), HSP-2 (1 spot) e CRISP-3 (2 spots). As mesmas foram identificadas por ferramentas de bioinformática, como a plataforma online MASCOT e as bases de dados UniProt, SwissProt, Equidae. Por esses resultados, espera-se auxiliar na compreensão de eventos biológicos que evidenciem procedimentos para a melhora do processo de reprodução de equinos. Apoio: FAPEMIG, CNPq, FINEP, CAPES, NuBioMol. |
| Palavras-chave | Proteômica, Plasma Seminal, Equinos |
| Forma de apresentação..... | Painel |