Conexão de Saberes e Mundialização
19 a 24 de outubro de 2015
Trabalho 4489
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Pós-graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Microbiologia |
| Setor | Departamento de Microbiologia |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Thyara Ferreira da Silva |
| Orientador | DENISE MARA SOARES BAZZOLLI |
| Outros membros | HILARIO CUQUETTO MANTOVANI, Josicelli Souza Crispim, Newton Moreno Sanches |
| Título | Perfil temporal de expressão da chaperona Hfq em Actinobacillus pleuropneumoniae sorotipo 8. |
| Resumo | Infecções que acometem o trato respiratório de suínos ocasionam significativas perdas econômicas na suinocultura mundial. Um dos principais patógenos bacterianos respiratórios em suínos é a bactéria Actinobacillus pleuropneumoniae, que causa a pleuropneumonia. Essa bactéria apresenta 15 sorotipos diferentes com distintos níveis de virulência. A virulência de A. pleuropneumoniae está associada a fatores como: exotoxinas RTX, LPS, cápsula e capacidade de formação de biofilme. O controle da doença é baseado no uso de antibióticos e cuidados no manejo, sendo a profilaxia pela imunização passiva não eficiente pela dificuldade na elaboração de uma vacina contra todos os sorotipos encontrados. Assim, novas abordagens experimentais na elaboração de uma vacina eficiente são essenciais porque podem representar novas alternativas na estratégia de controle da pleuropneumonia suína causada por A. pleuropneumoniae. A proteína Hfq é um componente central de regulação global pós-transcricional e participa diretamente na regulação da expressão gênica por facilitar a interação de pequenos RNAs com RNAs mensageiros alvos. Atualmente, muitos estudos têm como foco a proteína Hfq, uma vez que já foi demonstrado seu efeito pleitrópico e impacto na virulência, resposta ao estresse e no crescimento celular de vários patógenos, incluindo A. pleuropneumoniae. Portanto, esse trabalho teve como objetivo analisar parâmetros ainda indefinidos como a expressão de Hfq em A. pleuropneumoniae e a fase de maior abundância da proteína durante o crescimento da bactéria. O estudo foi conduzido com linhagens de A. pleuropneumoniae sorotipo 8, MIDG 2331 tipo selvagem e MIDG2331 hfq::3XFLAG. As linhagens foram cultivadas em meio BHI/NAD a 37°C por 24 horas em aerobiose. Alíquotas das culturas foram coletadas e analisadas por turbidiometria para estimativa do crescimento celular. A média do coeficiente angular da equação da regressão linear, obtida a partir da fase exponencial das curvas de crescimento, foi expressa como velocidade específica de crescimento (μ) e analisadas quanto à similaridade por ANOVA e Tunkey com nível de significância de 5%. A análise da expressão da proteína Hfq foi realizada por Western Blotting utilizando anticorpo monoclonal anti-FLAG (SIGMA). A partir destes resultados, foi possível constatar que a inserção da cauda FLAG na região carboxi-terminal da proteína Hfq não interferiu na velocidade específica de crescimento de A. pleuropneumoniae quando comparado à linhagem selvagem. Além disso, foi possível determinar a abundância da proteína Hfq no período de 6 a 8 horas de incubação, fase estacionária de crescimento (inicial e intermediária). Esses resultados fornecem subsídios importantes que confirmam a importância da proteína Hfq na regulação da expressão gênica, principalmente em condiçōes de estresse, situação esta encontrada na fase estacionária de crescimento bacteriano. |
| Palavras-chave | Pasteurellaceae, A. pleuropneumoniae, chaperona Hfq |
| Forma de apresentação..... | Painel |