Resumo |
A suinocultura é um importante setor do Estado de Minas Gerais, considerado o quarto maior produtor nacional. O setor é acometido por diferentes doenças respiratórias que afetam a produtividade e causam grandes impactos à economia, como, por exemplo, a pleuropneumonia suína causada por Actinobacillus pleuropneumoniae (APP), uma bactéria Gram-negativa da família Pasteurellaceae. De acordo com as exigências nutricionais de crescimento in vitro, APP é classificada em dois biotipos: NAD dependente (biotipo 1) e NAD independente (biotipo 2). Além disso, de acordo com determinantes antigênicos da cápsula, APP pode apresentar 15 sorotipos distintos (13 do biotipo 1 e 2 do biotipo 2). Os sorotipos 2, 7 e 8 são os mais encontrados no Estado de Minas Gerais, sendo o sorotipo 8 o mais amplamente distribuído nas fazendas investigadas. Os diferentes sorotipos apresentam padrões de virulência distintos, influenciados pela expressão de toxinas APX. Além disso, em ensaios de virulência, realizados por nosso grupo de pesquisa, com o modelo alternativo Galleria mellonella, isolados clínicos de APP sorotipo 8 apresentaram padrões variados de virulência. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram investigar a plasticidade genômica dos isolados a partir de análises da presença e distribuição de elementos repetitivos (BOX-PCR) e a velocidade de crescimento, uma vez que existem diferenças entre os isolados investigados em relação a dose letal em G. mellonella. Neste trabalho foram analisados 19 isolados clínicos de APP sorotipo 8, sendo obtidas as curvas de crescimento e os perfis de impressão digital genômica. Os perfis de crescimento dos isolados clínicos de APP 8 foram obtidos em condições de aerobiose em meio BHI-NAD à 37ºC ao longo de 15 horas. A média do coeficiente angular da equação da regressão linear, obtida a partir da fase exponencial das curvas de crescimento, foi expressa como velocidade específica de crescimento (μ) e comparadas por ANOVA. Os dados significativos para alfa de 5% foram discriminados e agrupados pela razão de verossimilhança utilizando o teste Scott-Knott. Os resultados da curva de crescimento revelaram que os isolados menos agressivos em G. mellonella também apresentaram menor velocidade de crescimento (p<5). A análise do perfil genômico revelou um significativo polimorfismo, permitindo o agrupamento dos isolados em 3 principais clados. Estes dados demonstram a existência de padrões variados de virulência entre os isolados de um mesmo sorotipo, o que pode estar ligado a fatores intrínsecos e ambientais. Nossos resultados mostram que a velocidade de crescimento de A. pleuropneumoniae é um fator decisivo na virulência. |