Resumo |
O mosquito Aedes aegypti é de grande importância médica, por ser capaz de transmitir os vírus da dengue e das febres amarela e Chikungunya. O intestino médio de A. aegypti é o local onde ocorre a digestão, armazenamento, síntese, secreção e absorção de nutrientes. Na fase adulta, ele constitui a porta de entrada de patógenos (como os vírus), tornando-se alvo de importantes estudos. Este órgão é revestido por um epitélio simples, formado por enterócitos colunares e com borda estriada, e revestido externamente por fibras musculares. No epitélio do intestino médio de A. aegypti encontram-se três tipos celulares: células digestivas, regenerativas e enteroendócrinas. Durante a metamorfose, o intestino médio é remodelado, novas células são formadas, enquanto outras morrem e algumas somente se modificam. No presente trabalho a quantidade dos três tipos celulares e o processo de apoptose e autofagia foram estudados em larvas e pupas de A. aegypti, no período larval de 3º instar (L3) até o início da pupação (24 horas após início da pupação, P24h). Os intestinos médios de larvas e pupas foram fixados em solução Zamboni, lavados em PBST 1%, incubados por 24 h a 4°C com anticorpos primários (anti-FMRFamida; anti-fosfohistona H3; anti-caspase-3 e anti-LC3 A/B). Posteriormente as amostras foram lavadas com PBS, incubadas com anticorpo secundário-FITC, corados com TO-PRO-3 por 30 min e montados em solução de Mowiol. As amostras foram analisadas e fotografadas no microscópio confocal Zeiss LSM 510 e os dados analisados através de ANOVA, significância de 5%. As análises histológicas e morfométricas mostraram a remodelação do intestino médio durante a fase larval até o momento da metamorfose, onde observamos uma distribuição variável das células do intestino durante cada fase. A proliferação celular foi identificada em todas as fases, como também as células enteroendócrinas FMRF-positivas. A autofagia inicia primeiro em L4 24h, e a apoptose inicia em L4 48h, porém, os dois processos intensificam durante a metamorfose. O presente trabalho demonstra a complexidade do processo de metamorfose do intestino médio de mosquitos, sendo necessários para a remodelação do órgão os dois processos de morte celular e autofagia, constituindo um equilíbrio com a proliferação celular. |