Resumo |
O Porcine circovírus 2 (PCV2) está associado a uma série de doenças de suínos que comumente são chamadas de Doenças Associadas ao Circovirus (PCVADs). Atualmente existe um amplo interesse na imunologia do PCV2, em particular, em relação às propriedades da proteína formadora do capsídeo viral (cap-PCV2). Esta proteína está relacionada com a imunogenicidade viral, sendo considerada como principal alvo na produção de vacinas contra esse patógeno. Neste contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar a imunogenicidade de dois peptídeos derivados de regiões antigênicas da cap-PCV2, previamente selecionadas pela técnica de phage display. Os peptídeos 127-CDNFVTKATALTY-138 (S34), 164-CKPVLDSTIDY-173 (C12), foram sintetizados pelo programa Peptide 2.0® e conjugados com Keyhole Limpet Hemocyanin para realização de ensaios de imunização. Camundongos balb/c machos, com 5-6 semanas de idade foram divididos em grupos de 5 animais e cada grupo foi imunizado com 100 ug do respectivo peptídeo diluído em tampão fosfato (PBS) (pH: 7,2) e 1% de DMSO. Para o grupo controle positivo (cap) foi utilizado 100 ug da proteína recombinante do capsídeo do PCV2 e para o controle negativo (C-) os animais foram inoculados com PBS e 1% de DMSO. Foi utilizado como adjuvante 100 ug de saponina por dose. Os animais foram imunizados pela via S.C com uma dose vacinal de 100 ul nos dias 0, 15 e 30. A coleta de sangue foi realizada no dia 0 e duas semanas após a última imunização. A resposta sorológica foi avaliada através do ensaio de ELISA indireto, utilizando a proteína recombinante do PCV2 como antígeno, e tendo como análise de dados a relação de s/p ratio. Os animais inoculados com os peptídeos selecionados exibiram diferentes respostas humorais, tendo o peptídeo C12 proporcionado maior indução de anticorpos IgG total (1,84±1,1) e IgG1 (2,16±1,36) quando comparados ao controle negativo (0,22±0,12 e 0,0±0,01, respectivamente) (P<0,05). A avaliação de regiões imunogênicas de proteínas de patógenos propicia o estudo dos mecanismos de resposta imunológica contra microrganismos, auxilia na melhoria das técnicas de sorodiagnóstico, além de possibilitar a discriminação entre patógenos com homologia antigênica. Sendo assim, a caracterização das regiões imunogênicas da proteína do capsídeo do PCV2 pode auxiliar o combate à infecção, possibilitando tanto a melhoria das vacinas já existentes, como o diagnóstico deste patógeno. |