Conexão de Saberes e Mundialização
19 a 24 de outubro de 2015
Trabalho 3839
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Doenças, reprodução e comportamento animal |
| Setor | Departamento de Biologia Geral |
| Bolsa | Outros |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES |
| Primeiro autor | João Paulo Pereira de Almeida |
| Orientador | JOSE LINO NETO |
| Outros membros | Glenda Samara Dias Santos |
| Título | Detecção molecular de Gregarina sp. (Alveolata: Apicomplexa) em vesículas seminais de Tribolium castaneum (Coleoptera: Tenebrionidae) |
| Resumo | Gregarinas são protozoários parasitas obrigatórios encontrados em cavidades corporais e tecidos de invertebrados marinhos e terrestres, consistem em um grupo extremamente abundante e diverso. A maioria das espécies é encontrada no intestino de seus hospedeiros, há relatos de estágios de transição em que gregarinas passam do intestino para as cavidades e órgão internos. Apesar da alta frequência de gregarinas parasitando coleópteros, existem poucos estudos detalhando a relação parasita/hospedeiro e caracterizando esses parasitas. Estudos com espécies do gênero Tribolium mostram que o intestino é o órgão no qual frequentemente encontra-se gregarinas e que, em alguns casos, a infecção causa danos ao hospedeiro. Em nosso trabalho observamos, por microscopia de luz e eletrônica, organismos com forma semelhante à de gregarina em vesículas seminais do besouro Tribolium castaneum. Devido ao ineditismo do órgão em que ocorreu a infecção utilizamos primers para a detecção de gregarinas em reações de PCR a fim de confirmar que os organismos encontrados eram, de fato, gregarinas por meio de fragmentos genômicos específicos amplificados. Foram extraídas vesículas seminais de 10 indivíduos. Devido à pequena massa de cada vesícula, foi realizada uma extração de DNA total das 10 vesículas juntas. A extração foi feita com o kit QIAamp DNA Micro Kit (QIAGEN®) seguindo protocolo especifico para amostras pequenas e delicadas. A qualidade do DNA extraído foi verificada por eletroforese em gel de agarose 0,8% corado com gelred. As reações de PCR utilizando o DNA extraído como template foram realizadas com primers para a região ITS1 do hospedeiro e da gregarina. O produto de PCR foi corado com gelred e submetido à eletroforese em gel de agarose 1,5% para verificação do tamanho dos fragmentos. A amplificação de dois fragmentos genômicos foi realizada com sucesso, sendo o fragmento maior (~2.000 pb) correspondente a ITS do hospedeiro e o fragmento menor (~1.000 pb) à ITS da gregarina, de modo que a amplificação deste último é um resultado positivo para a infecção por gregarina. Não há nenhum registro de infecção por gregarinas em vesículas seminais de insetos, dessa forma nosso resultado confirmou um tipo de infecção inédita. Por se tratar de uma relação parasita/hospedeiro especifica, essa confirmação fornece um ponto de partida para estudos evolutivos, ecológicos e fisiológicos. Além disso, por se tratar de uma praga secundária de diversas colheitas de cereais, a elucidação da interação descoberta pode fornecer estratégias para controle biológico do T. castaneum. |
| Palavras-chave | ITS1, parasita, PCR |
| Forma de apresentação..... | Painel |