Conexão de Saberes e Mundialização

19 a 24 de outubro de 2015

Trabalho 3795

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Biologia, produção e manejo animal
Setor Departamento de Biologia Geral
Bolsa PROBIC/FAPEMIG
Conclusão de bolsa Sim
Apoio financeiro FAPEMIG
Primeiro autor Monique Póvoa de Oliveira
Orientador DENILCE MENESES LOPES
Outros membros Rodrigo Vieira de Miranda
Título Identificação e mapeamento de sequências de DNA repetitivo nas abelhas sem ferrão Melipona mondury e Melipona quadrifasciata e sua contribuição para o conhecimento da estrutura e evolução do genoma de abelhas.
Resumo Regiões heterocromáticas do genoma eucarioto são constituídas por sequências repetidas várias vezes in tandem, as quais são referidas como DNA satélite. A potencial importância funcional do DNA satélite e a existência de uma ampla variedade de sequências satélites, tanto conservadas quanto divergentes entre espécies próximas, pode ser uma ferramenta para estudar a organização cromossômica, a variabilidade, filogenia e evolução de espécies.Neste trabalho foram utilizadas quatro espécies de abelhas indígenas sem ferrão do gênero Melipona que apresentam padrão de distribuição e quantidades diferentes de heterocromatina: Melipona bicolor, Melipona capixaba, Melipona mondury e Melipona quadrifasciata. O trabalho foi realizado no laboratório de Biologia Molecular de Insetos da Universidade Federal de Viçosa. Indivíduos adultos das quatro espécies foram coletados e o DNA total extraído e digerido por enzimas de restrição. A presença de sítios de restrição em sequências altamente repetitivas de DNA faz com que bandas sejam formadas após eletroforese em gel de agarose. Após os testes de digestão do DNA das quatro espécies por enzimas de restrição, identificamos melhores resultados com a enzima Bfa I na espécie Melipona capixaba, e estes foram os materiais utilizados nas fases seguintes do trabalho. As bandas de DNA repetitivo foram isoladas e o material genético presente nelas foi extraído usando Kits específicos.
Posteriormente os fragmentos de DNA foram clonados e enviados para sequenciamento. O sequenciamento do DNA satélite nessas espécies possibilitará uma comparação mais refinada, estabelecendo relação entre eventos evolutivos, bem como permitindo a descrição das famílias de DNA satélite nessas espécies e a verificação da presença de elementos transponíveis, não descritos ainda para abelhas. Outra estrategia feita para o estudo dessas espécies, foi a hibridização in situ fluorescente usando sondas de microssatélites. Essas sondas marcaram de forma diferente as espécies com alto e baixo conteúdo de heterocromatina. Entretanto, diferente do que se esperava, as marcações ocorreram predominantemente em regiões de eucromatina.
Ao fim do prazo de conclusão da bolsa chegamos as seguintes conclusões: a)A utilização de enzimas de restrição foi um método eficiente para a obtenção de DNA repetitivo também em abelhas. b)Espécies com grande quantidade de heterocromatina apresentaram mais bandas após a clivagem em comparação com espécies com baixa quantidade de heterocromatina. Isso pode ser explicado pela heterocromatina ser constituída principalmente por DNA repetitivo.
O uso de outras técnicas de biologia e citogenética molecular podem ser uteis para entender a organização e evolução cromossômica neste gênero de abelha.
Palavras-chave Melipona, enzimas de restrição, FISH.
Forma de apresentação..... Painel
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