Conexão de Saberes e Mundialização
19 a 24 de outubro de 2015
Trabalho 3742
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Biotecnologia |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | PIBITI/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Rafaela de Cássia Firmino |
| Orientador | JULIANA LOPES RANGEL FIETTO |
| Outros membros | GUSTAVO COSTA BRESSAN, Luciana Ângelo de Souza, MARCIA ROGERIA DE ALMEIDA LAMEGO, Matheus Silva e Bastos |
| Título | Avaliação das histonas deacetilases 1 e 3 de Leishmania braziliensis como alvo para a quimioterapia aplicada ao tratamento de Leishmaniose Tegumentar. |
| Resumo | Introdução:Leishmaniose Tegumentar é uma doença tropical negligenciada séria, responsável por cerca de 30 mil mortes por ano em todo o mundo. O protozoário Leishmania braziliensis é o principal agente patogênico desta doença no Novo Mundo. O tratamento é limitado, porque há poucos medicamentos disponíveis e estes são muito tóxicos. Por isto a Comunidade Européia está financiando projetos de desenvolvimento de novas drogas para tratamento de doenças parasitárias em geral.Neste sentido foi formado o consórcio A-PARADDISE (http:a-paraddise.cebio.org) do qual este projeto é parte integrante. O alvo deste projeto é o desenho racional de drogas para tratamento da Leishmaniose tegumentar através do uso de inibidores de enzimas modificadoras de histonas (HMEs). As histonas deacetilases (HDACs) são enzimas modificadoras de histonas que formam uma família de proteínas com um domínio deacetilase altamente conservado. Em trabalho com Trypanosoma brucei, foi visto que a HDAC1 e 3 são essenciais para sobrevivência deste parasito (Ingram, 2002).Dentro deste contexto as histonas deacetilases (DACs) se mostram alvos promissores para desenvolvimento de drogas. Este sub-projeto se propõe a identificar e clonar regiões codificadoras de histona deacetilases de L. braziliensis (HDACs) e validá-las como alvos para o desenvolvimento de drogas, acompanhando a expressão destes genes em diferentes fases de crescimento do parasito.Métodos: Ferramentas de bioinformática foram usadas para identificar as sequencias alvo.Para a clonagem dos alvos, promasgotas de L.braziliensis// foram cultivadas a 25 ° C em meio Grayce’s completo. O RNA total foi extraído com Trizol e ocDNA foi sintetizado utilizando Superscript III. O cDNA dos alvos foram amplificados por RT-PCR utilizando iniciadores específicos. Amplicons foram purificados e clonados em vetor bacteriano utilizando os kits de clonagem pJET ou pGEM. Resultados:Dois amplicons, relativos à duas sequencias codificadoras de HDACs de L.braziliensis (LbHDACs 1 e 3), foram identificados e clonados em vetor bacteriano.A LbHDAC1 foi amplificada, clonada e sua sequencia de nucleotídios foi confirmada por sequenciamento.Amplificação do cDNA a partir de LbHDAC3 foi bem sucedida, mas depois de várias tentativas de clonagem sem sucesso, foi comercialmente sintetisada.Foram também identificadas, clonadas e confirmadas por sequenciamento duas regiões codificantes de proteínas parceiras de HDACs contendo domínios denominados "Deacetylase Activator Domain" (conhecidas como proteínas DAD), possivelmente proteínas parceiras de HDACs. Conclusão:Identificamos e clonamos as regiões codificantes de LbHDAC1 e 3 e de duas proteínas parceiras que estão sendo usados para expressão heteróloga e desenho de inibidores a serem testados como candidatos para o tratamento de Leishmaniose Tegumentar em colaboração com outros grupos de pesquisa envolvidos no projeto A-ParadDDisE. |
| Palavras-chave | histona deacetilase, Leishmaniose Tegumentar, quimioterapia. |
| Forma de apresentação..... | Painel |