Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social
20 a 25 de outubro de 2014
Trabalho 3511
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Agroindústria, processamento e armazenamento |
| Setor | Departamento de Tecnologia de Alimentos |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Vitor Alledi da Rocha |
| Orientador | MONICA RIBEIRO PIROZI |
| Outros membros | Claudia Regina Vieira, EDUARDO BASILIO DE OLIVEIRA, Flávia Assunção Campelo, JULIANA IMACULADA LOPES FIALHO BATISTA |
| Título | Métodos de extração e processos de purificação de proteína estruturadora de gelo em cultivares de trigo de primavera e de inverno. |
| Resumo | Proteínas estruturadoras de gelo (ISP) são compostos sintetizados por diversos organismos animais e vegetais, como mecanismo de resistência ao frio. Pertencem a uma classe de polipeptídios capaz de inibir o crescimento dos cristais de gelo durante a nucleação, reduzindo os danos na estrutura celular desses organismos causados pela formação dos cristais. Em alimentos processados submetidos ao congelamento, o controle do crescimento dos cristais de gelo é crítico na manutenção da qualidade final do produto. Alguns estudos já demonstraram a ocorrência de ISP em folhas de trigo de primavera, mas ainda não foram definidas metodologias de extração e purificação eficientes para essas cultivares. O presente estudo foi realizado para avaliar a eficiência de duas metodologias de extração e três metodologias de purificação de ISP obtidas de folhas de três variedades de trigo, sendo duas de inverno (OK Bullet e Endurance) e uma de primavera (Pioneiro). As folhas liofilizadas de cada variedade, em três repetições, foram divididas em dois grupos e cada um passou por um método de extração. Na metodologia E1, as folhas foram cortadas, trituradas com Tris-HCl (pH=7,4), centrifugadas e filtradas para obtenção do extrato bruto contendo as proteínas. Para E2, as folhas foram trituradas com solução de ácido ascórbico:cloreto de cálcio (pH=3,0) e passaram por um processo de impregnação à vácuo. Os extratos brutos obtidos por E1 e E2 foram submetidos a três métodos de purificação: P1, no qual as amostras foram tratadas com acetona; P2, com solução de éter etílico: éter de petróleo e no método P3 foi utilizado clorofórmio. Em todos os métodos de purificação, os extratos brutos foram misturados aos respectivos solventes de purificação, agitados em vortéx e centrifugados. Os extratos brutos e purificados foram analisados quanto ao teor de proteína total pelo método de de Bradford, e por eletroforese em SDS-PAGE. Os resultados mostraram que a extração E1, com Tris-HCl foi a mais eficiente para a cultivar de primavera, Pioneiro, enquanto a extração por impregnação à vácuo (E2) foi a melhor para as variedades de inverno OK Bullet e Endurance. Um maior número de bandas proteicas foi identificado nos extratos brutos obtidos pela metodologia de extração E1, as quais exibiram massas moleculares entre 20,1 – 66,0 kDa. Nos extratos obtidos por impregnação à vácuo (E2) foi identificada apenas uma banda de proteína de 20,1-30,0 kDa. Em relação aos métodos de purificação, houve também distinção entre as cultivares, sendo que a purificação com clorofórmio (P3) foi mais eficiente na cultivar Pioneiro, enquanto a acetona (P1) foi melhor para as cultivares Ok Bullet e Endurance. Pode-se dizer que os processos de extração e purificação são influenciados pelas cultivares, e, portanto, procedimentos distintos para extração e purificação de ISP são requeridos. Os métodos testados no presente trabalho precisam ser otimizados antes de uma avaliação do potencial crioprotetor das ISP obtidas. |
| Palavras-chave | Triticum aestivum, proteína anticongelante, infiltração à vacuo. |
| Forma de apresentação..... | Painel |